Советуем для ознакомления:

Разделы генетики:

Популярные разделы сайта:

Оглавление темы "Проект геном человека. Векторы.":
1. Синдром Беквита—Видемана. Причины синдрома беквита—видемана. Потеря импритинга.
2. Значение геномного импритинга. Наследственные заболевания и геномный импритинг.
3. Механизм импритинга. Модели смены эпигенотипа хромосом.
4. Проект геном человека. Технология рекомбинантных ДНК.
5. Клонирование ДНК. Этапы клонирования днк. Рестрикционные ферменты. Рестриктазы. Эндонуклеазы.
6. Рекомбинация фрагментов ДНК. Механизм рекомбинации днк. Рекомбинантная днк.
7. Векторы. Внедрение фрагментов ДНК в клетку хозяина с помощью векторов.
8. Плазмиды. Бактериофаги. Космида. Бактериальные искусственные хромосомы. Искусственные дрожжевые хромосомы.
9. Выявление клеток-хозяев на рекомбинантный вектор. Скрининг клеток-хозяев на рекомбинантный вектор. Саузерн-блоттинг.
10. Геномные библиотеки. Создание геномных библиотек. Типы геномных библиотек.

Рекомбинация фрагментов ДНК. Механизм рекомбинации днк. Рекомбинантная днк.

Рестриктазы разрезают обе нити ДНК, которые в результате образуют либо тупые (как в случае Нра 1), либо липкие концы (рис. 7.1).

ДНК одного организма разрезается определенной рестриктазой в строго определенных местах, поэтому такая ДНК после рестрикции (которую также называют перевариванием) всегда будет давать один и тот же набор фрагментов.

Если использовать один вид рестриктазы для разрезания ДНК из разных организмов, то набор фрагментов окажется различным, но последовательность нуклеотидов в местах разрезания будет у всех фрагментов одной и той же и, следовательно, комплементарной друг другу при образовании у фрагментов липких концов.

Рекомбинация фрагментов ДНК. Механизм рекомбинации днк. Рекомбинантная днк.

Последние называют липкими, поскольку из-за комплементарности они могут соединяться с другими фрагментами, образованными той же самой рестриктазой или другой рестриктазой, образующей такие же концы.

Объединение фрагментов, обладающих липкими комплементарными концами, ускоряется и стабилизируется специальным ферментом, который называют лигазой.

Рис. 7.1. Липкие и тупые концы, образующиеся после рестрикции двойной нити ДНК рестриктазами Hind III и Hpa I. Черным цветом выделены последовательности нуклеотидов, распознаваемые рестриктазами.
Рекомбинация фрагментов ДНК. Механизм рекомбинации днк. Рекомбинантная днк.

Таким образом, если одной рестриктазой разрезать ДНК двух разных видов и смешать фрагменты, то может образоваться совершенно новая, не существующая в природных условиях молекула рекомбинантной ДНК.

Для того чтобы интересующий исследователя фрагмент ДНК можно было секвенировать, его необходимо размножить. Это можно сделать двумя разными методами, переместив его в клетку хозяина или размножив его in vitro.

- Читать далее "Векторы. Внедрение фрагментов ДНК в клетку хозяина с помощью векторов."