Необходимость использования количественных морфологических методов в данном исследовании была продиктована тем, что изменения тканевых и внутриклеточных компонентов в миокарде при увеличении или уменьшении функциональной нагрузки на сердце носят в основном количественный характер [Page E. et al., 1971, 1972; Richter G. W., 1974]. Стереологический анализ дает возможность выявить эти функционально обусловленные сдвиги структурного равновесия [Христолюбова Н. В., Шилов А. Г., 1974].

Для обеспечения рандомизированной репрезентативной выборки проводили систематический случайный отбор на каждом уровне исследования [Урбах В. Ю., 1975; Яблучанский Н. И., Губенко В. Г., 1978; Weibel Е. R. et al., 1966]. Оптимальный объем и структуру гнездовой выборки определяли заранее по предварительному исследованию. Для этой цели использовали дисперсионный анализ [Катинас Г. С. и др., 1969; Катинас Г. С, Полонский Ю. З., 1970; Непомнящих Л. М. и др., 1980, 1981; Shay J., 1975].

Анализируемая площадь срезов для каждого животного составляла 230640 мкм2 (3 блока, по 20 наложений на срез тестовой системы размером 3844 мкм2). В качестве основных первичных стереологических параметров вычисляли относительный объем (VVi) и относительную площадь поверхности (SVi) тканевых структур.

Определяли относительный объем паренхимы (кардиомиоцитов и их ядер) и стромы миокарда. Среди стромальных компонентов оценивали кровеносные капилляры, эндотелиальные клетки, клетки соединительной ткани (суммарно, не дифференцируя на клеточные типы), основное вещество и волокна соединительной ткани. Определяли относительную площадь поверхности кардиомиоцитов, их ядер, внутренней поверхности капилляров и клеток соединительной ткани.

Для характеристики пространственных паренхиматозно-стромальных взаимоотношений на уровне тканевого микрорайона ценную информацию могут дать вторичные стереологические параметры — объемные, поверхностные и поверхностно-объемные отношения основных тканевых компонент. Эти параметры вычисляли, используя первичные данные.

Аналогичным образом находили объемные отношения отдельных компонентов стромы к паренхиме (капилляров к кардиомиоцитам, клеток соединительной ткани к кардиомиоцитам, основного вещества, волокон соединительной ткани к кардиомиоцитам).

В качестве параметров, характеризующих взаимоотношение капилляров и кардиомиоцитов, рассматривали не только объемное отношение этих структур, но и соотношение «обменных поверхностей» капилляров и сердечных миоцитов.
На продольных полутонких срезах папиллярной мышцы измеряли также диаметр сердечных миоцитов с помощью окулярного микрометра МОВ-1-15х.

- Читать далее "Стереологический анализ кардиомиоцитов. Получение среза миокарда"