Определение инсулина в организме
Рекомендуемый Фармакопеей США метод определения инсулина основан на сравнении гипогликемической активности исследуемого препарата с активностью фармакопейного стандарта; опыты проводятся на кроликах. Стандарт сравнения содержит 0,1—0,4 мг цинка на 1000 инсулииовых единиц и консервант, рН которого находится между 2,5 и 3,5. Активность кристаллического инсулина составляет 22 единицы на 1 мг.
В качестве метода определения активности инсулина было также предложено устанавливать дозу препарата, вызывающую возникновение судорог у мышей. Однако этот метод оказался менее точным, чем метод, рекомендуемый Фармакопеей США.
Для оценки инсулиноподобной активности крови можно использовать величину снижения концентрации сахара в крови крыс с удаленными надпочечниками и гипофизом через 1 час после внутрибрюшинного введения им исследуемой пробы крови. С помощью данного метода можно определить наличие от 0,2 до 2 миллиединиц инсулина на 1 мл плазмы.
Содержание инсулина в жидкостях организма можно определить in vitro с помощью метода, в основе которого лежит оценка эффекта на метаболическую активность изолированной диафрагмы или жировой ткани придатка яичка крысы. С этой целью измеряют скорости потребления глюкозы, включения глицина, меченного С14, в белок, или образования СО2.
Для иммунологического определения инсулина предложено использовать сыворотку морских свинок, содержащую антитела к человеческому инсулину, и сыворотку кроликов, содержащую антитела к у-глобулинам морских свинок, меченные J131. Этот метод весьма чувствителен и пригоден для определения содержания инсулина в сыворотке больных и здоровых людей.
Он основан на том, что инсулин человека тормозит образование комплекса между бычьим инсулином, меченным J131, и связывающими инсулин антителами. Связывающие инсулин антитела, вырабатывающиеся в сыворотке морских свинок, иммунизированных бычьим инсулином, метят I131. С помощью хроматографического электрофореза на бумаге можно определить содержание меченого инсулина в 0,01—0,02 мл плазмы крови. Согласно данным, полученным с помощью описанного выше иммунологического метода, суточная секреция инсулина составляет около 55 единиц.
В нормальных условиях через 30—60 минут после приема 100 г глюкозы содержание инсулина в плазме достигает максимума (143 микроединицы) и через 2 часа возвращается к нормальному уровню.
- Химия инсулина и ее структура
- Синтез и обмен инсулина
- Определение инсулина в организме
- Эффекты инсулина на животных
- Потребность организма в инсулине
- Роль печени и инсулина в обмене углеводов
- Влияние инсулина на обмен жиров и белков
- Влияние надпочечников и гипофиза на эффекты инсулина
- Глюкагон и его эффекты
- История и заболеваемость сахарного диабета