Советуем для ознакомления:

Фармакология:

Популярные разделы сайта:

Стабильность рецепторных препаратов. Количественное определение рецепторов

Однако при столь многочисленных достоинствах радиорецепторный анализ долгое время имел в качестве существенного недостатка низкую стабильность мембранных препаратов рецепторов. Следствием этого являлись необходимость постоянного выделения мембранных препаратов и связанная как с различными выделениями, так и с низкой стабильностью каждого отдельно выделенного препарата нестандартность мембран.

В последнее время проблема стабильности и стандартности мембранных препаратов была успешно решена. Авторами настоящей работы получены лиофилизованные мембранные препараты, обладающие крайне высокой стабильностью даже при комнатной температуре. (Зайцев с соавт., 1984; Сергеева с соавт., 1986).

Помимо стабильности рецепторов важным моментом в радиорецепторном анализе пептидов является проблема стабильности меченого и исследуемого лигандов, поскольку препараты мембран, как правило, содержат целый набор протеолитических ферментов. Эту проблему обычно решают путем добавления в среду анализа ингибиторов пептидаз (Miller et al., 1977; Altstein et al., 1983), работой при пониженных температурах (Gillan et al., 1985; Summers, Hayes, 1980) и использованием стабильных меченых лигандов (например, аналогов содержащих D-аминокислоты или эфирные и амидные группы на С-конце) (Kosterlitz, 1980; Tremean et al., 1981; Paterson et al., 1984).

Необходимо отметить, что радиорецепторный метод анализа "чувствует" все те соединения, которые высокоэффективно взаимодействуют с рецепторами. Поэтому, если в анализируемом образце содержится несколько соединений, способных высокоспецифично связываться с рецепторами, то метод дает их эффективную суммарную концентрацию.

рецепторные препараты

Полученная концентрация в общем случае не является суммой концентраций данного класса соединений в образце, поскольку эти соединения, несомненно, как-то различаются по сродству к рецепторам и зависят от вида лиганда, использованного для построения калибровочной кривой, в чьих эквивалентах она и выражается.

Определение общей эффективной концентрации соединений данного вида в ряде случаев является не недостатком, а даже достоинством радиорецепторного метода, поскольку позволяет получать ценную информацию об общей активности в образце данного класса соединений по отношению к специфическим к ним рецепторам.

В основе количественного определения соединений радиорецепторным методом лежит конкурентное ингибирование связывания меченого лиганда со специфическими к нему рецепторами. Полученные в ходе анализа результаты измерения радиоактивности связанной с мембранами метки сравнивают со стандартной (калибровочной) кривой и по ней определяют концентрацию исследуемого лиганда.
В простейшем случае, когда меченый и исследуемый лиганды специфически связываются только с одним рецептором R.

- Читать далее "Чувствительность радиорецепторного анализа. Зависимость точности радиорецептивного анализа"

Оглавление темы "Опиоидные рецепторы":
1. Чувствительность u-рецепторов под действием металлов. Взаимодействие энкефалина с бета-рецептором
2. Влияние цинка на опиоидные рецепторы. Влияние верапамила на обмен энкефалина
3. Влияние металлов на обмен морфина. Различия опиоидных и кальциевых каналов
4. Катионсвязывающие группы опиоидных рецепторов. Природа катионных групп рецепторов опиоидов
5. Фосфатные группы опиоидных рецепторов. Селективные активаторы энкефалина
6. Радиорецепторный анализ. Техника радиорецепторного анализа
7. Стабильность рецепторных препаратов. Количественное определение рецепторов
8. Чувствительность радиорецепторного анализа. Зависимость точности радиорецептивного анализа
9. Влияние на радиорецепторный анализ гетерогенности рецепторов. Лиофилизированные мембраны в радиорецептивном анализе
10. Натриевый сдвиг от лиофилизированных мембран. Фармакокинетика морфина и энкефалинов