Ключевыми характеристиками любого метода анализа, в том числе и радиорецепторного, являются его чувствительность и точность. Поэтому представляется целесообразным остановиться на рассмотрении этих характеристик более подробно.

Чувствительность радиорецепторного анализа можно определить как минимальную, доступную измерению с помощью данной кривой концентрацию лиганда [L]min. Следовательно, [L]min -наименьшая концентрация лиганда, при которой отличие уровня связывания меченого лиганда с мембранами [B*]1 и уровня его связывания в отсутствие немеченого лиганда [В*]0 еще статистически значимо. Под статистической значимостью в данном случае понимается, что в предположении, что ошибки измерения величин [В*]о и [B*]i нормально распределены и оценки стандартных отклонений S1 их средних значений [В*]о и [B*]i одинаковы, средние значения [В*] и [B*]i различаются по критерию Стьюдента (Rodbard, 1978; Зайцев, Сергеева, Варфоломеев, 1985).

Анализ уравнения позволяет сделать следующие выводы: 1) чувствительность анализа возрастает с уменьшением ошибки определения [В*], характеризуемой параметром y; 2) [L]min прямо пропорциональна константе диссоциации немеченого лиганда К, поэтому ра-диорецепторный анализ необходимо проводить в условиях, обеспечивающих максимальное сродство немеченого лиганда, т.е. при оптимальных значениях температуры, рН и определенном ионном составе среды; 3) чувствительность анализа тем выше, чем меньше отношение [L*]/K*. Последнее говорит о целесообразности проведения анализа при концентрациях меченого лиганда [L*]< К*.

Выражение дает тенденцию изменения [L*] с целью оптимизации чувствительности. Однако практически нет необходимости, а иногда и возможности использовать концентрацию [L*] меньше 0,1-0,2 величины К*, поскольку, с одной стороны, это реально не дает сколь-нибудь существенного увеличения чувствительности метода, а с другой - при низкой удельной радиоактивности меченого соединения приведет к тому, что регистрация радиоактивного счета с заданной точностью, связанного с мембранами меченого лиганда, окажется слишком длительной.

В этой связи в радиорецепторном анализе следует отдавать предпочтение лигандам, меченным йодом-125 или тритием. При этом в случае трития желательно, чтобы лиганды имели специфическую радиоактивность не ниже 10-20 Ки/ммоль.

Из соотношения также следует, что чувствительность радиорецепторного метода анализа тем выше, чем меньше отношение и зависит, в частности, от величины константы неспецифического связывания Кнс.

- Читать далее "Влияние на радиорецепторный анализ гетерогенности рецепторов. Лиофилизированные мембраны в радиорецептивном анализе"