Лабораторная диагностика сибирской язвы
Основным методом лабораторной диагностики является выделение возбудителя от больных. Материалом для исследования служат: содержимое везикул и пустул и отделяемое карбункулов и язв (кожная форма болезни), мокрота (легочная форма), испражнения (кишечная форма), кровь больных (сепсис).
Идентификация выделенных культур производится на основании морфологических и культуральных признаков, а также на основании биопробы.
В качестве сигнальных (экспрессных) методов бактериологического исследования используют метод выявления капсулообразования in vitro и метод выявления капсулообразования in vivo (ускоренная биологическая проба по Э. Н. Шляхову и Е. В. Груз).
Предварительное заключение по сигнальным методам лаборатория может дать через 3—5 часов после поступления материала.
В связи со слабым, непостоянным антителообразованием и недлительным сохранением образованных антител серологические методы диагностики сибирской язвы у человека недостаточно разработаны.
Для выявления антител предложена РНГА с полиантигенным диагностикумом (Т. А. Бурденко), а для определения антигена — РНГА с антительным диагностикумом (Б. Л. Черкасский с соавт).
Для определения иммунологических сдвигов, наступающих в организме больных и привитых, используют сибиреязвенный аллерген — антраксин. Кожно-аллергическая проба с антраксином ставится внутрикожно в дозе 0,1 мл, учет осуществляется через 24—48 часов. За положительную реакцию принимается гиперемия и инфильтрат на месте введения антраксина диаметром более 0,8 см.
Проба с антраксином применяется в целях ранней диагностики текущего заболевания (в первые 3 дня заболевания 85,7% положительных реакций, на первой неделе — 90%), давая более эффективные результаты, чем бактериологическое исследование (до 50% находок возбудителя за то же время). Антраксиновая проба — единственный метод постановки ретроспективного диагноза, она бывает положительной у переболевших до 3 лет назад — в 93,2%, от 4 до 15 лет — в 82,8% и от 16 до 30 лет —в 73,3%.
Для обнаружения термостабильного антигена возбудителя в органических субстратах (шкуры, кожи, кусочки ткани трупа, струпы и т. п.) производят реакцию преципитации по Асколи. Антигеносодержащий субстрат кипятят (или автоклавируют) в 50—100-кратном объеме физиологического раствора, фильтруют через бумажный или прокаленный асбестовый фильтр.
В преципитационные (узкие) пробирки наливают 0,2—0,3 мл стандартной преципитирующеи сыворотки, на которую осторожно наслаивают полученный термоэкстракт. В положительных случаях в пределах 1—2 минут на границе жидкостей образуется белесое кольцо преципитата.
Для индентификации возбудителя на объектах внешней среды (споры) или же в биопробном материале разработан метод иммунофлуоресценции. Идентификация бациллы антракса по наличию спор в нативном материале может быть достигнута при минимальном содержании 1 млн спор в мл субстрата.
Повышение чувствительности и достоверности метода осуществляется подращиванием материала на питательных средах или путем биопробы. В первом случае исследование длится 6—7 часов, но чувствительность повышается до содержания 100—200 спор в 1 мл исходного материала. При осуществлении биопробы иммунофлуоресцентныи метод направлен на выявление в мазках-отпечатках капсульных форм бациллы антракса. Срок исследования в данном случае может увеличиться до 18—24 часов. Капсульные формы в биопробном материале обнаруживаются и методом простой окраски мазков, и микроскопированием в обычном микроскопе.
- Читать "Профилактика сибирской язвы и противоэпидемические меры"
- Вернуться в оглавление раздела "Инфекционные болезни"
Оглавление темы "Бруцеллез. Сибирская язва":- Профилактика сальмонеллеза и противоэпидемические меры
- Бруцеллез - история, география, возбудители
- Источник бруцеллеза и его резервуар
- Клиника бруцеллеза у животных и человека
- Лабораторная диагностика бруцеллеза
- Профилактика бруцеллеза и противоэпидемические меры
- Сибирская язва - история, география, возбудители
- Источник сибирской язвы и ее резервуар
- Клиника сибирской язвы у животных и человека
- Лабораторная диагностика сибирской язвы