Сроки определения ВИЧ в крови после заражения
В связи с серьезной озабоченностью случаями передачи возбудителя СПИДа через кровь основные усилия на раннем этапе изучения ВИЧ были направлены на количественное определение вируса в этой жидкости. Результаты показали, что в крови можно обнаружить как свободные инфекционные вирусы, так и инфицированные клетки, причем ВИЧ-инфицированные клетки содержатся в большем количестве, чем свободные инфекционные вирусы.
В крови, так же как и в других жидкостях организма, с помощью метода ПЦР было обнаружено большое количество неинфекционных вирусов и клеток, содержащих дефектные вирусные геномы, которые не являются источником заражения. В настоящее время ВИЧ-1 субтипа В является доминирующей вирусной инфекцией у доноров крови в Соединенных Штатах, хотя у 2% людей обнаруживают инфицирование другими субтипами ВИЧ-1, а также ВИЧ-2.
Врачам и вирусологам стало очевидно, что необходимо разработать и оптимизировать методы определения инфекционного вируса на ранних стадиях вирусемии. Первоначальные данные говорили о том, что свободный инфекционный вирус присутствует в крови у 30-50% инфицированных людей.
b Тенденция к обнаружению повышенного титра вируса в сочетании с уменьшением количества CD4+-клеток была статистически достоверна (тест Крушкала-Уоллеса).
Однако по мере усовершенствования методов определения вируса было показано, что в большинстве образцов крови содержится циркулирующий инфекционный вирус независимо от того, болен ли ВИЧ-инфицированный СПИДом, или находится на клинически бессимптомной стадии развития заболевания. Количество вирионов может достигать от 100 до 1000 инфекционных частиц (ИЧ) на миллилитр крови.
Важно отметить, что у клинически бессимптомных инфицированных обнаруживают очень низкое содержание вируса, а у людей, которые остаются бессимптомными без лечения в течение 10 лет после инфицирования (т.е. долговременных непрогрессоров), вирус часто не определяется существующими методами. Для оптимального подсчета содержания свободного инфекционного вируса в крови необходимо исследовать плазму в течение не более чем 3 часов после венопункции. В противном случае нейтрализующие антитела, комплемент и другие неустановленные факторы плазмы могут приводить к уменьшению инфекционной способности ВИЧ. Важным параметром в методике определения инфекционно-дееспособного вируса в плазме является время инкубации биопробы с клетками-мишенями - не менее 24 часов.
Инфекционный ВИЧ можно обнаружить на стадии острого инфицирования (т.е. в течение первых 7-14 дней после заражения), но через несколько недель уровень содержания вируса в крови существенно снижается. Причина такого уменьшения вирусемии связана с активацией противовирусного иммунного ответа.
Затем по мере развития заболевания, сопровождающегося характерным уменьшением количества CD4+-клеток, концентрация инфекционного ВИЧ в крови значительно увеличивается, что отражает возрастание содержания вируса в мононуклеарных клетках периферической крови и в лимфоидных тканях. Таким образом, как отмечали выше, риск передачи инфекционного ВИЧ другим людям, по-видимому, наиболее велик на ранних стадиях инфицирования и после манифестации клинических симптомов.
b Количество случаев обнаружения инфекционных вирусов или инфицированных клеток на общее количество исследованных образцов.
с Высокое содержание соответствует симптомам развитого заболевания.