Лабораторная диагностика

Способ определения кальция основан на осаждении его в виде щавелевокислой соли кальция, который затем определяют титрованием 0,01 н. раствором марганцовокислого калия.

Необходимые реактивы:
1) насыщенный водный раствор щавелевокислого ахммония;
2) 2% раствор аммиака;
3) нормальный раствор серной кислоты;
4) дважды дистиллированная вода;
5) 0,01 н. раствор марганцовокислого калия.

Методика определения. В центрифужную пробирку вливают 1 мл сыворотки крови, прибавляют 2 мл дважды дистиллированной воды и 1 мл реактива № 1. Оставляют стоять 15 минут, затем центрифугируют 8—10 минут. После этого осторожно удаляют пипеткой жидкость с осадка, на осадок наливают 4 мл реактива № 2, смешивают и центрифугируют 5—7 минут, сливают жидкость Так промывают осадок еще 2—3 раза После того как последний раз снимают жидкость с осадка, на него наливают 2 мл реактива № 3, пробирку ставят в кипящую баню на одну минуту и титруют из бюретки 0,01 н. раствором марганцовокислого калия до появления розового окрашивания, устойчивого в продолжение одной минуты Необходимо ставить одновременно и контрольный опыт на реактивы. Берут 2 мл реактива № 3, нагревают на водяной бане и титруют 0,01 н. раствором марганцовокислого калия, как и при основном опы те, до появления розового окрашивания, не исчезающего в течение минуты.
Расчет: 1 мл 0,01 н раствора марганцовокислого калия, ушедшего на титрование, соответствует 0,2 мг кальция

Пример: взято 1 мл сыворотки крови; при титровании ушло 0,54 мл 0,01 н. раствора марганцовокислого калия. В данном количестве сыворотки (1 мл) кальция будет 0,2 0,54 = 0,108 мг. Отсюда в 100 мл сыворотки будет 0,108- 100 = 10,8 мг или в данной сыворотке кальция имеет 10,8 мг%.

Если при титровании контрольного опыта потребовалось какое-то количество 0,01 н. раствора марганцовокислого калия, т. е. сам реактив содержит тоже какое-то количество кальция, например 0,04 мл, то для получения точного результата надо из 0,54 вычесть 0,04, тогда 0,2 • (0,54—0,04) = 0,10 мг; а в 100 мл = 10мг%. Нормальное содержание кальция в сыворотке составляет 9,5—10,5 мг%.

Определение хлоридов по Рушняку

В присутствии избытка азотнокислого серебра в кислой среде органические вещества крови разрушаются марганцовокислым калием. Часть азотнокислого серебра связывается с хлором, избыток его определяют титрованием роданистым аммонием при наличии железо-аммиачных квасцов, служащих индикатором.
Количество крови, необходимое для реакции — 0,2 мл.

Необходимые реактивы:
1) 0,01 н. раствор азотнокислого серебра.
2) 0,01 н. раствор роданистого аммония.
Указанные растворы готовят из 0,1 н. растворов; при титровании оба раствора должны точно совпадать между собой, в противном случае вносят поправку.

3. Концентрированная азотная кислота (удельный вес 1,4), не содержащая хлора и азотистой кислоты.
4. Насыщенный раствор марганцовокислого калия (сохранять в посуде из темного стекла).
5. Виноградный сахар в порошке — химически чистый, не содержащий хлора (продажный сахар имеет хлор).
6. Железо-аммиачные квасцы в порошке (не содержащие хлора).

Оборудование:
1. Микропипетки емкостью в 0,2 мл и 0,1 мл.
2. Пипетка Мора емкостью в 2 мл.
3. Микробюретка на 2 мл.
4. Колбочки емкостью 30—40 мл.
Обычно ставят параллельно два опыта с одной и той же испытуемой кровью и одновременно третий опыт — контрольный, только с реактивами, без крови.

- Читать далее "Техника определения хлоридов. Определение щелочного резерва крови"