Советуем для ознакомления:

Лаборатория:

Популярные разделы сайта:

Определение индикана. Техника определения индикана

При соединении индоксила и тимола, в присутствии соляной кислоты, с полуторахлористым железом получается индиголигнон, характеризующийся розово-фиолетовой окраской.

Реактивы:
1) 20% раствор трихлоруксусной кислоты (употребляется для осаждения белков);
2) 5% раствор тимола в 95° спирте;
3) реактив Обермейера (5 г полуторахлористого железа; растворяют в 1 л крепкой соляной кислоты, с удельным весом 1,19);
4) хлороформ.

Методика определения. В сухую центрифужную пробирку с делениями вливают 4 мл испытуемой свежей сыворотки крови и прибавляют столько же 20% раствора трихлоруксусной кислоты (реактив № 1), смешивают жидкости, дают постоять 3—4 минуты, а затем центрифугируют в продолжение 10 минут. Полученную прозрачную жидкость сливают в сухую центрифужную пробирку с делениями.

определение индикана

Отметив количество этой жидкости, прибавляют 1 мл 5% спиртового раствора тимола (реактив № 2) и реактива Обер-мейера в количестве, равном полученной жидкости. Содержимое пробирки хорошо смешивают, закрывают пробкой и оставляют на час. Приливают 1 мл хлороформа, опять хорошо смешивают в продолжение одной минуты, после чего центрифугируют 4—5 минут.

Полученную жидкость над хлороформом отсасывают осторожно пастеровской пипеткой, а в пробирку с фиолетового цвета хлороформом вливают еще хлороформ и разводят до получения розоватого окрашивания его. В другую такую же чистую пробирку вливают чистый хлороформ, обе эти пробирки закрывают пробками и сравнивают их на белом фоне, отмечая различие розовато-фиолетово окрашенного хлороформа в испытуемой жидкости от цвета чистого хлороформа.
Отмечают по делениям на пробирке количество хлороформа, употребленного на разведение испытуемого раствора до слабого розовато-фиолетового цвета.

Количество индикана вычисляется следующим образом. Известно, что при наличии в 2 мл хлороформа 0,0032 мг индикана хлороформ окрашивается в слабо-розовато-фиолетовый цвет, если для исследования было взято 6 мл жидкости, т. е. 3 мл сыворотки крови, а для получения розовато-фиолетового цвета к хлороформу в испытуемой пробирке было прибавлено 5,4 мл чистого хлороформа, то количество индикана в 100 мл данной сыворотки будет: 0,032*5,4*100 / 2*3*1,6 = 0,18 мг%.

В знаменатель формулы вводят 1,6 потому, что при осаждении белков 20% трихлоруксусной кислотой по формуле получается индикана в 1,6 раз больше, чем в действительности.
В норме кровь содержит 0,026—0,08 мг% индикана. При кишечных заболеваниях и заболевании почек количество индикана в крови увеличивается.

- Читать далее "Гемометр Сали. Техника работы гемометром Сали"

Оглавление темы "Методы исследования крови в лаборатории":
1. Определение кальция по Де-Варду. Определение хлоридов по Рушняку
2. Техника определения хлоридов. Определение щелочного резерва крови
3. Техника определения щелочного резерва. Ход определения щелочного резерва
4. Расчет щелочного резерва. Вычисление щелочных резервов крови
5. Оксигемометр и оксигемометрия. Техника оксигемометрии
6. Определение индикана. Техника определения индикана
7. Гемометр Сали. Техника работы гемометром Сали
8. Гемометр ГС-2. Смесители для подсчета эритроцитов и лейкоцитов
9. Счетные камеры. Разновидности счетных камер
10. Подсчет эритроцитов. Расчет цветового показателя