Для оценки идиотипической специфичности антител кролика использовали гетерологичные и гомологичные антисыворотки. Последние получали, вводя повторна кроликам-реципиентам очищенные антитела определенной специфичности от индивидуальных доноров. Подбирали доноров и реципиентов таким образом, чтобы они совпадали по основным аллотипам иммуноглобулинов (последнее желательно, чтобы избежать процедуры адсорбции антисыворотки нормальными иммуноглобулинами донора). Показано, что антитела одной и той же специфичности, но от разных доноров различаются строением идиотипических детерминант.

Вместе с тем миеломные белки от различных индивидуумов, специфически реагирующие с одним и тем же антигеном, могут иметь в ряде случаев сходные идиотипы. Так, кроличья антисыворотка против антител к пара-азофениларсонату, полученных от одной из мышей линии A/J, реагировала с антителами той же специфичности многих мы.шей этой линии.

Значительный интерес представляет возможность получения антител к идиотипическим детерминантам аутологичных иммуноглобулинов. В одном из подобных экспериментов в качестве антигена служили Р(аb)2-фрагменты кроличьих антител против пара-аминофеннл-N-триметиламмония. Фрагменты антител от индивидуальных доноров иолимеризовали глутаральдегидом и вводили тем же кроликам спустя 6 месяцев после получения антисывороток. В этот период у животных уже не удавалось обнаружить антител указанной специфичности.

Методом непрямой преципитации с радиомеченым антигеном у каждого из подопытных кроликов были обнаружены антитела против F(ab')2-фрагментов собственных антител. Поскольку эти анти-антитела не реагировали с Р(аb)2-фрагментами антитела в присутствии специфического гаптена, можно было заключить, что они направлены к детерминантам непосредственно в районе активного центра антитела. Именно в этом районе находятся детерминанты, определяющие идиотип иммуноглобулина (L. Rodkey, 1974).

Важный факт установили Л. Клюскенс и Г. Кёлер (L. Kluskens, H. Kohler, 1974) при исследовании сывороток мышей BALB/c, многократно иммунизированных пневмококком R3GA (так называемый фосфорилхолиновый антиген). В сыворотке одновременно выявлялись как антифосфорилхолиновые антитела, так и анти-антитела со свойствами антиидиотипических, т. е. направленных к детерминантам в Fab-фрагменте.

Как в гетерологичной, так и в изологичной антиидиотипической сыворотках содержатся антитела к детерминантам, находящимся непосредственно в активном центре антитела, а также детерминантам, удаленным от него. Первые из указанных анти-антител не взаимодействуют с антителом после блокирования его активного центра гаптеном.

Используя этот методический прием, удалось показать, что в гетерологичной антисыворотке свыше 90% антител направлено к детерминантам, удаленным от активного центра, в то время как в изологичной антисыворотке содержатся преимущественно анти-антитела к детерминантам, непосредственно примыкающим к активному центру. Следовательно, гетерологичные и изологичные антиидиотипические антитела направлены к различным, хотя и близко расположенным детерминантам.

- Читать "Идиотип иммуноглобулина. Вариотипические детерминанты"