ДНК поксвирусов синтезируется в цитоплазме клетки, причем инициация в подавляющем большинстве клеток может происходить вне зависимости от того, синтезирует ли клетка собственную ДНК в момент заражения или нет (Кэрнс, 1960). Удобным способом количественного определения синтеза ДНК поксвирусов является измерение включения 3Н-тимидина в цитоплазматический кислоторастворимый материал после разделения зараженных клеток на ядерную и цитоплазматическую фракции.

Синтез ДНК вируса осповакцины начинается через 1,5—2 ч после заражения и фактически завершается к 6 ч, когда впервые появляется новый инфекционный вирус. Что касается ДНК вируса оспы птиц, то она синтезируется между 12 и 48 ч после заражения куриных клеток.

К тому времени, когда синтез вирусной ДНК прекращается, большая часть ДНК все еще чувствительна к экзогенной ДНКазе. Это наводит на мысль о том, что причиной остановки синтеза является не включение ДНК в капсиды или истощение запасов предшественников, а более тонкий регулирующий механизм. Для синтеза вирусной ДНК необходим продолжающийся белковый синтез, так что при подавлении синтеза белка циклогексимидом резко угнетается репликация ДНК (Кейтс и Мак-Ослен, 1967).

Необходимый белок—это стабильный ранний вирус-специфический белок; он отличается от известных ферментов, участвующих в синтезе ДНК, и накапливается при избирательном блокировании синтеза ДНК. Исходя из стехиометрических отношений между белком и реплицирующейся ДНК можно предположить, что этот белок не обладает ферментативной активностью и тесно связан с вирусной ДНК.

Сборка и выход из клетки поксвирусов

Понимание процесса созревания поксвирусов основано главным образом на данных, полученных при электронно-микроскопическом изучении зараженных клеток; позднее с этой же целью изучали размножение вирусов в присутствии рифампицина. Наиболее обширные исследования по корреляции биологических событий и их морфологических проявлений при поксвирусной инфекции проведены Дейлсом, изучавшим репродукцию вируса осповакцины в L-клетках (Дейлс, 1963а; Кадзиока и др., 1964).

Начальная транскрипция осуществляется в сердцевинах, затем вирусная ДНК высвобождается и дает начало особым зонам в цитоплазме, названным Кэрисом (1960) «фабриками» (вироплазмой), где синтезируются и собираются вирусные компоненты. Вироплазма становится видна через 2—3 ч после заражения как зона плотных гранул и случайно ориентированных тонких нитей, которые, по-видимому, раздвигают митохондрии и другие клеточные органеллы.

Плотный материал вироплазмы затем агрегирует в группы плотных нитей, внутри и вокруг которых образуются ограничивающие мембраны. Эти мембраны развиваются в виде «шляпок» на одном краю вироплазмы и постепенно растут, образуя сферическую поверхность, которая со временем полностью окружает пироплазму, формируя «незрелую частицу». Позже и в разных препаратах в различной степени небольшие очаги заключенной в оболочку вироплазмы эксцентрически конденсируются внутри незрелых частиц.

Эти слабопроницаемые для электронов конденсаты представляют собой, вероятно, вирусную ДНК (Розенкранц и др., 1966). Зрелый вириои несколько меньше, чем только что описанная незрелая частица, но он имеет более сложную структуру с большими латеральными телами и внешней двойной мембраной.

- Читать далее "Рифампицин и белки поксвирусов. Тельца-включения поксвирусов"