Через 4 ч после заражения методом электрофореза в полиакриламидном геле в клетках выявляются все 7 структурных белков реовируса (Ло и Шаткин, 1968; Р. Смит и др., 1969), один из которых — u2— является продуктом расщепления белка u1 (Звееринк и др., 1971). Кроме того, Звееринк и др. обнаружили два неструктурных белка u2 и q2; таким образом, общее число известных первичных генных продуктов равно 8; 2 неидентифицированных неструктурных белка либо синтезируются в следовых количествах, либо мигрируют в геле с другими белками, поскольку из полисом можно извлечь мРНК всех 10 видов (Уорд и др., 1972); 9 описанных вирус-специфических белков идентифицированы в L-клетках при 31 °С; при 37 °С на поздних стадиях цикла в результате протеолитического расщепления (возможно, артефактного) белков u1 или u2 образуются еще 3 полипептида (Звееринк и др., 1971).

В бесклеточной системе, содержащей рибосомы из L-клеток и эндогенную реовирусную мРНК, образуются те же 8 первичных генных продуктов, однако расщепления u1—u2, а также u1—XYZ и u2—>XYZ не происходит (Мак-Доуэл и Йоклик, 1971).

Репликация РНК реовирусов

Матрицей для синтеза новых двухцепочечных РНК in vivo или in vitro является одноцепочечная мРНК (Шонберг и др., 1971). Иными словами, одноцепочечная плюс-РНК служит матрицей как для синтеза вирусных белков, так и для репликации вирусной РНК- После импульсного мечения радиоактивным уридином вся радиоактивность обнаруживается в минус-цепях двухцепочечного продукта.

В то время как одиночные плюс-цепи (мРНК) синтезируются на двухцепочечных матрицах и накапливаются в цитоплазме в течение первых 8 ч после заражения, одиночные минус-цепи не обнаруживаются в свободном состоянии ни in vivo, ни in vitro; они всегда входят в состав двухцепочечных РНК.

Для того чтобы катализировать образование двухцепочечных молекул на матрице одноцепочечных мРНК, очевидно, необходим фермент, отличный от вирионной транскриптазы. Такой фермент (репликаза), образующий двухцепочечные РНК всех классов, был обнаружен в L-клетках Ватанабе и др. (1968а); фермент впервые обнаруживается через 4 ч после заражения, и его концентрация достигает максимума через 8 ч.

Из зараженных клеток удалось раздельно выделить как репликазу, так и транскриптазу, причем оба препарата содержали эндогенные матрицы (Сакума и Ватанабе, 1971). Однако авторы подчеркивают, что эти два фермента не обязательно полностью различны; предположительно репликаза может превращаться в транскриптазу, когда при формировании субвирусной частицы комплекс фермент — матрица связывается с дополнительным белком.

- Читать далее "Сборка реовирусов. Степень выражения генов реовирусов"