Случаи «рекомбинации» между РНК-содержащими вирусами, геном которых состоит из одной молекулы РНК, по-видимому, ограничиваются двумя уже описанными примерами — полиовирусом и вирусом ящура. Сообщения о рекомбинации у других вирусов сейчас объясняют комплементацией в результате образования вирусных агрегатов или гетерополиплоидии.

Тем более важно проанализировать данные, приводимые в подтверждение факта генетической рекомбинации у двух упомянутых пикорнавирусов. Наиболее строгим доказательством было бы выявление реципрокных рекомбинантов в урожае единичных клеток при смешанном заражении.

Попытка Слэйда и Прингла (1971) обнаружить реципрокные формы в урожае рекомбинантов вируса ящура из единичных клеток не привела к успеху из-за малой эффективности инфекционного процесса, а в полиовирусной системе наличие 0,1—0,5% реципрокных мутантов (т. е. частиц с двумя ts-мутациями) недостаточно четко выделялось на фоне спонтанного образования таких мутантов.

Вывод о том, что у полиовируса вообще происходит рекомбинация, основан (как и во многих других случаях) главным образом на обнаружении двойных (иногда тройных) мутантов, количество которых достоверно превышает ожидаемый фон спонтанных мутаций, определяемый в опытах по самоскрещиванию. Это превышение достигает подчас 30-кратной (обычно 10—20-кратной) величины и наблюдается с воспроизводимой частотой, характерной для данной пары родительских мутантов.

Природа полиовирусного генома делает очень маловероятным предположение о том, что здесь имеет место перераспределение генов, подобное тому, какое происходит у реовируса и вируса гриппа.

Такие тривиальные причины, как, например, агрегация вирионов, исключаются и методическими приемами, и постоянством результатов, получаемых при повторных скрещиваниях.

Купер и его сотрудники (личное сообщение, 1973) попытались проверить, содержат ли рекомбинанты полиовируса нормальное количество РНК. Для этого они сравнивали рекомбинантные формы с родительским вирусом по коэффициенту седиментации, плавучей плотности и чувствительности к ультрафиолетовому излучению. Никаких различий найдено не было.

При серийной проверке потомства примерно в 50 рекомбинантных клонах не удалось обнаружить каких-либо сегрегантов (хотя использованная методика была достаточно чувствительна, чтобы выявить один вирион родительского фенотипа среди 105 вирионов рекомбинантов). Наконец, результаты, получаемые Купером и его сотрудниками в большом числе опытов, на протяжении многих лет остаются весьма постоянными; частоты рекомбинаций аддитивны, а данные по четырем десяткам мутантов, полученные при рекомбинационном, физиологическом и ингибиторном анализе, согласуются между собой при построении генетической карты.

Единственно вероятное объяснение этих результатов состоит в том, что между геномами полиовирусов может происходить строго упорядоченный молекулярный обмен такого же типа, как у ДНК-содержащих бактериофагов или Е. coli. В этом процессе, возможно, участвуют специфические ферменты, аналогичные ферментам разрыва-воссоединения ДНК, однако из-за ограниченного спаривания оснований в полиовирусном репликативном комплексе (Эберг и Филипсон, 1971) не исключается также возможность отделения от него матриц.

Следовательно, рекомбинация у полиовируса может быть результатом того, что растущие цепи переходят с одной матрицы на другую, а затем достраиваются с помощью реплика-зы без участия каких-либо иных ферментов, соединяющих молекулы РНК (один из вариантов механизма со сменой матрицы).

- Читать далее "Перераспределение генома реовирусов. Перераспределение генома вирусов гриппа"