SV40 был открыт Суитом и Хиллеманом (1960) как контаминант культур клеток почек обезьян того типа, который использовался для производства вакцины против полиомиелита. Независимо Эдди и сотр. (1961) исследовали способность вирусов, обнаруженных в клетках почки обезьяны резус (Халл н др., 1958), вызывать опухоли у хомячков. Они не выделяли вирусы, а использовали непосредственно экстракты из культур клеток почки обезьяны резус, подвергнутых замораживанию и оттаиванию.

Такие экстракты из некоторых партий клеток после введения их новорожденным хомячкам вызывали трансплантируемые опухоли. Затем (Джирарди и др., 1962; Эдди и др., 1962) онкогенный агент был идентифицирован как SV40. Онкогеyysе свойства SV40 во многом сходны с таковыми вируса полиомы, причем для изучения клеточной трансформации SV40 в некоторых отношениях предпочтительнее.

SV40 вызывает опухоли у новорожденных хомячков (Джирарди и др., 1962) и крыс Mastomys (Рэбсон и др., 1962), но не у других видов (Эдди, 1964), хотя культивируемые клетки многих видов животных могут быть трансформированы in vitro. Патогистология подкожных фибросарком у хомячков описана Блэком и Роу (1964), Эдди (1964), Джирарди и Хиллеманом (1964), а эпендимой — Джербером и Киршстайн (1962).

Для анализа типов опухолей, вызываемых отдельными клетками, Блэк и сотр. (1966) использовали клональные линии трансформированных клеток. Результаты показали, что потомство одной клетки почки хомячка, трансформированной SV40, способно вызывать у хомячков рост опухолей нескольких типов. В большинстве опухолей обнаруживалась некоторая степень дифференцировки эпителия; гистологически они, по-видимому, представляли собой нефробластомы.

Хотя отдельные опухоли вырабатывали небольшое количество инфекционного вируса, большинство опухолей вызванных SV40, были безвируоными (Сэбин и Кох, 1963а; Джербер и Киршстайн, 1962; Ашкенази и Мелник, 1963). Однако рядом исследователей обнаружено, что во многих (хотя и не во всех) безвирусных опухолях после их длительного культивирования на чувствительных клетках африканских зеленых мартышек можно найти небольшие количества вируса (Джербер и Киршстайн, 1962). Сэбин и Кох (1963а), использовав этот метод, показали, что потенциальная способность к продуцированию инфекционного вируса присуща каждой опухолевой клетке.
Им удалось выделить вирус из опухолей, развившихся у хомячков, которым было введено приблизительно по две опухолевые клетки.

Сэбин и Кох (1963b) сообщили, что урожай вирусов можно повысить с помощью разных методов, в том числе с помощью рентгеновского облучения культивируемых опухолевых клеток. Джербер (1964) подтвердил эти данные и показал, что небольшое количество вируса можно индуцировать в культуре клеток безвирусной зпендимомы хомячка также путем воздействия ультрафиолетовыми лучами и обработки перекисью водорода или митомицином. В культуральной жидкости и в клеточных лизатах из таких культур клеток эпендимой инфекционный SV40 отсутствует; однако Джербер (1963) обнаружил, что при посадке опухолевых клеток на индикаторный монослой клеток почки зеленой мартышки возникают мелкие колонии, вокруг которых развивается характерная для SV40 вакуолизация обезьяньих клеток. Эксперименты с клетками почки кролика (которые могут быть заражены ДНК SV40, но не инфицируются вирионами SV40) и с «парабиотическими» культурами «вирогенных» и индикаторных клеток показали, что перенос инфекционности не обусловлен переносом вирионов, а требует прямого контакта жизнеспособных вирогенных клеток с индикаторными (Джербер, 1964, 1966).

Интерпретация этих результатов оставалась сомнительной до 1967 г., когда Уоткинс и Дульбекко (1967) и Копровский с сотр. (1967) независимо друг от друга обнаружили, что клетки, трансформированные SV40, действительно свободны от вируса, но вирус может быть «спасен» при слиянии трансформированных клеток с чувствительными пермиссивными клетками. Эти опыты однозначно показали, что в каждой клетке трансформированной линии постоянно сохраняется полный набор вирусных генов. В свете этого успеха с SV40 удивительно, что все попытки таким же образом «спасти» вирус полиомы из трансформированных клеток оказались неудачными.

Мы вернемся к рассмотрению возможных объяснений этого парадокса после детального обсуждения взаимодействия этих двух вирусов с культивируемыми клетками.

- Читать далее "Вирус полиомы в культуре клеток. Обезьяний вирус и клетки"