Поскольку пуромицин или циклогексимид в первые 12 ч после заражения не влияют на «сход инфекции (Бейдер, 1966, 1972а), очевидно, для образования провируса синтез новых белков не требуется. Это означает, что фермент, ответственный за превращение исходного вирусного генома в провирусную форму, либо присутствует в клетке перед заражением, либо вносится в нее вместе с вирионом.

Справедливость последнего предположения была доказана Мизутани и Темином (1970) на ВСР и Балтимором (1970а) на вирусе мышиного лейкоза Раушера. Эти исследователи обнаружили в вирусных частицах РНК-зависимую ДНК-полимеразную активность.

Их открытие вызвало большое волнение и привело к быстрому накоплению обширной информации о свойствах и распространении нового фермента. Эта информация очень хорошо обобщена в нескольких обзорах.

Хотя ни одно из свойств этой полимеразы не противоречит постулированной для нее роли в синтезе провирусной ДНК, прямые данные об активности фермента в «летках после заражения отсутствуют, и поэтому трудно сделать окончательное заключение о его биологической функции. Для того чтобы доказать участие фермента в трансформации и (или) вирусной репликации, было использовано два подхода.

ВСРа. Ханафуса и Ханафуса (1968) выделили вариант штамма Брайен ВСР, названный ВСРа. Он не способен заражать клетки, не трансформирует куриные клетки и не содержит РНК-зависимой ДНК-полимеразной активности (Ханафуса и Ханафуса, 1971; Робинсон и Робинсон, 1971). Однако ВСРа может быть «спасен» в виде инфекционного и трансформирующего псевдотипа [ВСРа (РАВ)] при суперинфекции клеток, образующих ВСРа, раус-ассоциированным вирусом.

Дефект вирионов ВСРа не связан со свойствами оболочки, и вирионы нормально проникают в клетку (X. Ханафуса и др., 1970; Ханафуса и Ханафуса, 1971). Это позволяет предположить, что ВСРа дефектен по РНК-зависимой ДНК-полимеразе, и, по-видимому, из-за этого дефекта мутант не способен трансформировать клетки. Поскольку клетки, трансформированные псевдотипом ВСРа (РАВ), образуют нетрансформирующие вирионы ВСРа, лишенные фермента, можно считать, что РНК-зависимая ДНК-полимераза необходима лишь для установления, а не для поддержания трансформированного состояния.

Однако однозначно дефектность ВСРа только по РНК-зависимой ДНК-полимеразе еще не доказана, и для решения этого важного вопроса необходимы дальнейшие исследования с набором подобных мутантов.

Химические ингибиторы. Некоторые вещества (рифампицины и стрептоварицины), подавляющие РНК-зависимую ДНК-полимеразу in vitro (Гёрго и др., 1971; Галло и др., 1970, 1971; Брокман и др., 1971), блокируют инфекцию, вызываемую опухолеродными РНК-вирусами (Кальвин и др., 1971; Картер и др., 1971; Рикерт и Бальдуцци,1971). Однако, прежде чем этот результат можно будет принять как доказательство того, что вирусная полимераза необходима для инфекции и (или) трансформации, мы должны быть уверены в абсолютной специфичности и нетоксичности этих ингибиторов. К сожалению, как то, так и другое вызывает сомнение.

В заключение отметим следующее: имеются серьезные основания считать, что на ранних этапах инфекции вирусная РНК направляет синтез провирусной ДНК. В вирусных частицах присутствует фермент, который катализирует образование ДНК in vitro на матрице вирионной РНК. Однако окончательные доказательства того, что этот фермент отвечает за синтез провируса, отсутствуют.

- Читать далее "Судьба провируса в клетках. Лейковирусы мышей"