Полипептиды некоторых лейковирусов были изучены с помощью методов электрофореза в полиакриламидном геле и гель-фильтрации в присутствии гуанидина-НС1; исследованы также их антигенные свойства. Несмотря на небольшие расхождения между различными группами исследователей в оценке точного числа полипептидов и их локализации внутри частицы, вырисовывается довольно стройная картина. Правда, имеются затруднения непринципиального характера, связанные с отсутствием общепринятой номенклатуры для полипептидов и антигенов.

Очищенные вирионы всех лейковирусов содержат семь или восемь полипептидов Два из них — гликопротеиды, локализованные в пепломерах вирусной липопротеидной оболочки (Рифкин и Компанс, 1971) и несущие штаммоспецифическую антигенную активность, которую можно идентифицировать с помощью реакции нейтрализации, иммунофлуоресценции зараженных живых клеток или вирусной интерференции. В состав нуклеоида входит несколько полипептидов с группоспецифической антигенной активностью, идентифицируемой с помощью иммунодиффузии, реакции связывания комплемента и иммунофлуоресценции фиксированных препаратов клеток.

Несколько полипептидов нуклеоида несут группоспецифические антигенные детерминанты, которые распадаются на два класса: а) детерминанты, специфичные для лейковирусов, выделенных от животных одного вида, и б) детерминанты, общие для вирусов, изолированных от разных видов. Все РНК-содержащие опухолевые вирусы обладают группоспецифическим (gs) антигеном, однако «межвидовой» антиген свойствен лишь лейковирусам млекопитающих.

Ферменты. В вирионах лейковирусов обнаружен набор разнообразных ферментов, в том числе лактатдегидрогеназа и гексокиназа (Мизутани и Темин, 1971), рибонуклеаза (Розенбергова и др., 1965), рибонуклеаза Н, эндонуклеаза (Мизутани и др., 1970) и экзонукле-аза, расщепляющая ДНК (Мизутани и др., 1971), полинуклеотидлигаза (Мизутани и др., 1971; Хёрвиц и Лайс, 1972), АТФаза (Моммерц и др., 1952), нуклеотидкиназа и фосфатаза (Мизутани и Темин, 1971), протеинкиназа (Стрэнд и Огаст, 1971), РНК-метилаза (Гант и др., 1971), аминоацил-тРНК-синтетаза (Эриксон и Эриксон, 1972) и РНК-зависимая ДНК-полимераза (Темин и Мизутани, 1970; Балтимор, 1970).

Часть этих ферментов, например АТФаза, локализована в вирусной липопротеидной оболочке, однако многие связаны с нуклеоидом, поэтому для выявления ферментативной активности необходимо предварительно разрушить оболочку нейтральным детергентом. Кодируются связанные с вирусом ферменты геномом клетки-хозяина или геномом вируса, не известно; однако, без сомнения, многие из них в процессе созревания вируса адсорбируются на вирусных нуклеоидах или оболочках или содержатся в пузырьках, загрязняющих препараты вирионов. Несмотря на отсутствие прямых доказательств, есть основания считать, что по крайней мере некоторые из связанных с вирионами ферментов играют роль при трансформации клеток и размножении вируса. Например, заманчиво предположить, что функция РНК-зависимой ДНК-полимеразы заключается в синтезе провирусной ДНК и что связанные с вирионом лигаза и нуклеазы участвуют в интеграции провирусной ДНК с геномом клетки-хозяина.

РНК-зависимая ДНК-полимераза различных лейковирусов была выделена в очищенном виде, и ее свойства интенсивно изучались в нескольких лабораториях (см. обзоры: Галло, 1971; Темин и Балтимор, 1972). Фермент в количестве около десяти молекул на вирусную частицу локализован внутри оболочки вириона (Касьян и др., 1971). Молекулярный вес очищенного фермента из вирусов мышей составляет приблизительно 90000 (Хёрвиц и Лайс, 1972). Фермент из вирусов птиц больше, он состоит из двух полипептидных субъединиц с мол. весами 110 000 и 69 000.

Кроме ДНК-полимеразной активности, очищенный фермент из птичьих вирусов обладает активностью рибонуклеазы Н, расщепляющей РНК в ДНК— РНК-гибридах (Мёллинг и др., 1971b; Келлер и Крауч, 1972).

По антигенным свойствам РНК-зависимая ДНК-полимераза отличается от всех других белков вирусной частицы; этот фермент содержится в вирусной частице в незначительном количестве. Ферменты вирусов млекопитающих и птиц иммунологически различны; ферменты, выделенные из разных вирусов млекопитающих подрода А, обнаруживают между собой некоторое антигенное родство. Между ферментами вирусов подрода А и ферментом вируса опухолей молочных желез мышей (подрод В) антигенной связи не обнаружено.

Почти все липиды, входящие в состав лейковирусов, локализованы в наружной липопротеидной оболочке вирионов. Оболочка образуется из плазматической мембраны клетки-хозяина, поэтому не удивительно, что липидный состав вирусов весьма близок к липидному составу изолированных плазматических мембран. Вместе с тем имеются и некоторые различия. Например, фосфолипиды по крайней мере некоторых штаммов вируса саркомы Рауса содержат существенно больше сфингомиелина и меньше фосфатидилхолина, чем плазматические мембраны клетки-хозяина (Куигли и др., 1971). Это можно объяснить тем, что вирионы почкуются на специфических участках клеточной мембраны, состав которых слегка отличается от состава основной ее части.

- Читать далее "Нуклеиновая кислота лейковирусов. РНК лейковирусов"