В литературе существует ошибочное мнение, что чувствительность разных видов анаэробов, в том числе иародонтопатогенных, принципиально не различается и что для их эрадикации достаточно применения препаратов группы имидазола или анти-биотиков-линкозамидов (линкомицин и клиндамицин).

Однако это далеко не так. За последние 10-20 лет накоплено достаточно данных о резистентности отдельных видов анаэробных бактерий не только к имидазолам и лин-комицину, но также к бета-лактамам, тетрациклинам, левомицетину и макролидам.

Проведенный нами мониторинг резистентности свыше 1600 штаммов облигатно-анаэробных видов, выделенных при воспалительных заболеваниях челюстнолицевой области и пародонтите в клиниках г. Москвы за период с 1985 по 2010 гг. показал неуклонное увеличение количества резистентных штаммов к классическим препаратам с «противоанаэробным» механизмом действия.

По сравнению с 1985 г. довольно резко (примерно в 3 раза) возросла устойчивость штаммов анаэробных бактерий к «старым» макролидным препаратам — эритромицину и, особенно, олеандомицину (до 65,0 и 90% соответственно). С 25% в 1985 г. до 50 % в 2010 г. увеличилось число штаммов, устойчивых к метронидазолу. С 1995 г. отмечен интенсивный рост числа штаммов, устойчивых к тетрациклину. В настоящее время выявляется до 40 % устойчивых штаммов.

Исследования чувствительности штаммов анаэробных бактерий in vitro позволили нам следующим образом расположить группы современных химиопрепаратов по степени ее убывания:

1) антибиотики с показателем количества чувствительных и высокочувствительных штаммов свыше 90 %: из бета-лактамных — амоксиклав, карбснициллин, цефалоспорины III—IV поколения (цефтриаксон, цефепим, цефтибутен); фторхинолоны IV поколения — моксифлоксацин, гемифлоксацин, гатифлоксацин; карбапенемы (имепенем); новые антибиотики из группы оксазалидонов (линезолид), а также доксициклин, левомицетин, грамицидин С;

2) препараты с показателем от 81 до 90%: макролиды — азитромицин, кларитромицин, спирамицин, рокситромицин, из цефалоспоринов — цефамандол, фторхинолоны III поколения — спарфлоксацин, левофлоксацин, а также рифампицин;

3) препараты с показателем от 61 до 80%: линкозамиды — линкомицин, клиндамицин, из бета-лактамов — амоксициллин, цефалексин, из фторхинолонов — ципрофлоксацин;

4) препараты с показателем от 40 до 60 %: имидазолы — метронидазол, нитазол; из бета-лактамов — ампициллин, цефотаксим, цефтазидим; из фторхинолонов — ломефлоксацин, норфлоксацин, а также ванкомицин и ристомицин;

5) препараты с показателем ниже 40%: аминогликозиды, из макролидов — эритромицин, олеандомицин, из фторхинолонов — налидиксовая кислота, офлоксацин, а также клотримазол, сульфаниламиды и нитрофураны.

В большинстве случаев применение этиотропной антибактериальной химиотерапии инфекционно-воспалительных оппортунистических заболеваний является затруднительным. Это в первую очередь связано с преимущественно анаэробным характером инфекции, что не только замедляет этиологическую характеристику процесса, но и существенно утяжеляет и удорожает проведение микробиологических исследований. Разумеется, принцип этиотропной терапии применим в случаях тяжелой, продолжительной инфекции (остеомиелит, флегмоны 2-3 областей, перитонит и др.). Кроме того, определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам диктуется необходимостью получения данных о структуре резистентности возбудителя. На практике эти данные используют при эмпирическом назначении антибиотиков.

а) Резистентность микроорганизмов к антибиотикам может быть природной и приобретенной. В полной мере это касается и анаэробных видов.

Известны следующие биохимические механизмы устойчивости анаэробных бактерий к антибиотикам:
• модификация мишени действия;
• инактивация антибиотика;
• активное выведение антибиотика из микробной клетки (эффлюкс);
• нарушение проницаемости внешних структур микробной клетки;
• формирование метаболического «шунта».

Помимо состава микробных ассоциаций, неэффективность антибиотикотерапии может быть вызвана и другими факторами, в том числе:
• высокой степенью микробной обсемененности;
• формированием биопленок с участием вирулентного вида;
• нейтрализацией препарата секретами организма и тканевыми структурами;
• инвазией бактерий в ткани с формированием осумкованных очагов, абсцессов;
• диссеминацией микробов из первичных очагов, генерализация инфекции.

б) Определение чувствительности анаэробных бактерий к антибиотикам возможно как методами разведений, так и диско-диффузионным методом. Особенностью является необходимость сохранения безкислородных условий культивирования (анаэробиоза) и, как правило, содержание 5 % крови и гемина в среде, на которой проводится тестирование.

При определении чувствительности методом серийных разведений обычно используют специальные жидкие среды (тиогликолевую) или полужидкие (среда АС). В этом случае посевы могут инкубироваться в термостате при 37 С до 48 часов без дополнительного создания анаэробиоза за счет редуцирующих свойств среды. Большинство авторов все-таки рекомендуют помещать посевы в анаэростаты и в случае использования специальных сред.

Для определения чувствительности методом дисков (диско-диффузионным) рекомендуется применять 5%-ый гемин-агар в чашках Петри, которые сразу после посева помещают в анаэростат.

В 1991 г. нами предложена методика кассетного микрометода, которая сочетает в себе достоинства двух вышеописанных методов. Она позволяет определять не только чувствительность, но и минимальную ингибирующую концентрацию (МИК). Для этого разведения разной концентрации тестируемых антибактериальных препаратов выполняются в пластиковой кассете с лунками, затем раствор высушивается и заливается ex tempore расплавленным агаром, который застывает. Кассеты предварительно укладывают во влажные камеры (чашки Петри). На поверхность лунок с агаром наносят инокулюм штамма. Через 18-24 часа изучают выросшие колонии (в случае устойчивости штамма к препарату в данной концентрации), используя бинокулярную лупу (стереомикроскоп). Делают предварительное заключение и помещают в анаэростат для дальнейшего роста. Окончательное заключение делают через 5-7 суток.

- Читать далее "Заключение об этиологической значимости выделенных штаммов анаэробных бактерий"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 24.4.2020