Санитарно-ветеринарные правила содержания лабораторных животных

Организация вивария (от лат. vivus—живой) для содержания опытных животных при лечебно-клинических учреждениях и научно-исследовательских институтах допускается только с ведома территориального центра санэпиднадзора.

а) Основные требования к виварию. Он должен соответствовать современным требованиям научной технологии биомоделей и обеспечивать нормальную жизнедеятельность лабораторных животных. Проведение работ с лабораторными животными на высоком гигиеническом уровне может быть обеспечено при следующем ориентировочном планировании вивария: административные помещения, зона приема животных, техническая, служебная и асептическая зоны. Административные помещения включают кабинеты для персонала, общие комнаты, бытовые комнаты, туалеты, душевые.

Барьерный шлюз и помещения для карантина составляют зону приема животных. В технической зоне размещено оборудование, обеспечивающее виварий электроэнергией, водой, вентиляцией. Служебная зона включает складские помещения для корма, подстилочного материала, отходов, прачечную, мойку, помещение для стерилизации (сквозные автоклавы). Асептическая зона состоит из помещений для приема животных, их содержания, склада для хранения корма, чистых клеток и инвентаря для ухода за животными, «чистого» коридора для снабжения и «грязного» коридора для удаления отходов. В асептической зоне располагаются помещения для проведения исследований на лабораторных животных, назначение которых определяется задачами экспериментальных работ (патоморфологические, бактериологические исследования и др.). Между перечисленными зонами должны быть четкие функциональные связи. Современные виварии должны быть обеспечены оборудованием для стерилизации клеток, стеллажей, подстилки и корма, кремационной печью для уничтожения биологических отходов и трупов животных, устройством для обеззараживания сточных вод.

В случае необходимости работы с опасными возбудителями инфекций должны быть предусмотрены специальные помещения для содержания лабораторных животных и работы с ними.

Специализированные клетки для лабораторных животных:
а — для мышей, крыс, морских свинок; б — для кроликов.

В соответствии с существующими санитарными правилами виварий размещается в отдельно расположенном здании или на верхнем этаже лабораторного корпуса. При размещении вивария в лабораторном корпусе он должен быть полностью изолирован от всех других помещений.

Все помещения должны быть оборудованы водопроводом, приточно-вытяжной вентиляцией, канализацией. В вивариях должны быть помещения для хранения инвентаря, кормов, средств дезинфекции.

Полы в помещениях вивария изготовляют из водонепроницаемых материалов (бетон, асфальт или синтетическое покрытие). Стены на высоту 2 м облицовывают керамической плиткой или окрашивают масляной краской.

При входе на территорию вивария и в каждом из его помещений должны быть установлены дезинфекционные барьеры.

Поддержание температуры тела в пределах физиологической нормы очень важно для теплокровных животных. Поэтому лабораторных животных рекомендуется содержать при определенных параметрах температуры и влажности окружающего воздуха.

Вентиляция помещений должна обеспечивать 10-15-кратную смену воздуха в течение часа. В вивариях нельзя использовать вместо вентиляции вещества, маскирующие запахи животных. Степень очистки воздуха в помещениях для содержания животных определяется категорией используемых лабораторных животных:
а) конвенциальные;
б) свободные от патогенной микрофлоры (СПФ);
в) безмикробные (гнотобиоты);
г) СПФ-животные для работы с радиоизотопами.

Требования к очистке воздуха в помещениях, где содержатся животные, приведены в таблице ниже.

Освещение регулируется соответственно с потребностями животных и персонала, работающего в виварии.

б) Основные правила содержания лабораторных животных. В виварий животные должны поступать из специализированных питомников и сопровождаться ветеринарным свидетельством, удостоверяющим, что хозяйство благополучно по инфекционным заболеваниям, и животные клинически здоровы.

Поступающие извне животные должны обязательно проходить карантин изолировано по видам, независимо от принадлежности к любой из четырех категорий. Животных принимают в чистые заранее продезинфицированные клетки, размещают в карантинном отделении сроком на три дня для адаптации к новым условиям. Время и порядок карантина устанавливаются в зависимости от целей опыта. В период карантина за животными ведется регулярное клиническое наблюдение с ежедневной термометрией и регистрацией общего состояния в специальном журнале, в котором, кроме того, фиксируют данные о поставщике, дату поступления животных, регистрируют вид, пол, массу тела, возраст животных, распределение по клеткам, дату окончания карантина, кому переданы животные. На основании записей в журнале выписывают карантинное удостоверение. Исходя из задач опыта, могут проводиться бактериологические, иммунологические, биохимические и другие исследования карантинированных животных с целью контроля их здоровья.

Следует избегать нарушений санитарного режима, контакта с больными из числа обслуживающего персонала, чтобы исключить отрицательное воздействие на здоровье животных.

В целях предупреждения заноса и распространения инфекции в виварии уход и наблюдение за животными, находящимися в карантине, осуществляются персоналом, закрепленным за данным отделением. Запрещается выносить из карантинного отделения в другие помещения вивария корма, спецодежду и инвентарь. Чистка, мойка посуды, клеток и другого инвентаря из карантинного помещения проводятся в общем дезинфекционно-моечном отделении вивария только после предварительного обеззараживания. Методы дезинфекции в каждом конкретном случае определяются в соответствии со спецификой работы учреждения.

При выявлении больных животных в карантинном отделении вся партия животных изолируется и подвергается обследованию с целью постановки диагноза. При наличии инфекционного заболевания поступившая партия животных уничтожается.

Лечение больных, как правило, крупных животных (кролики, собаки) возможно, если оно не препятствует последующим испытаниям. Сведения о характере и времени проведенного лечения подлежат хранению.

При возникновении массовых заболеваний среди животных, находящихся в карантине, или при обнаружении в период экспериментов отдельных случаев инфекционных заболеваний, особо опасных для лабораторных животных, в виварии проводится необходимый комплекс профилактических мероприятий. В таких случаях опыты на животных временно прекращаются.

По истечении карантинного срока выписывают карантинное удостоверение и животных переводят в экспериментальную секцию.

Мышей, крыс, хомяков, морских свинок и кроликов содержат в клетках, установленных на металлических стеллажах. Грызунов помещают в клетки со сплошным дном на подстилке или с сетчатым полом. Подстилочным материалом могут служить древесные опилки, стружка, волокнистый торф, мягкая солома. Подстилки заранее автоклавируют. Грызунам подстилку следует менять 1-3 раза в неделю, крупным животным — ежедневно. Клетки и другой инвентарь подлежит стерилизации до размещения животных.

При размещении животных по клеткам рекомендуется исходить из нормативов, приведенных в таблицах ниже.

Клетки должны быть сконструированы так, чтобы обеспечивать удовлетворение нормальных поведенческих и физиологических потребностей животных, включая мочеиспускание и дефекацию, поддержание температуры тела, нормальные движения и позы, а также, по показаниям, размножение. Важно обеспечить безопасность животного, в том числе исключить возможность его бегства. Конструкция клетки должна обеспечивать доступ животных к корму и воде, а также позволять легко менять подстилочные материалы, обслуживать и наблюдать за животными, не вызывая их беспокойства.

Клетки изготавливаются из материалов, которые удовлетворяют как потребностям животных, так и требованиям гигиены и санитарии.

В каждом отдельном помещении вивария рекомендуется содержать только один вид животных. Если по условиям эксперимента в одной секции возможно совместное содержание животных разных видов, размещать их следует на разных стеллажах. Обязательна маркировка используемых в эксперименте животных, наличие учетной карточки по особям с регистрацией происхождения, линии, фамилии экспериментатора, даты поступления, начала испытаний и т.д. Образец учетной карточки приводится ниже.

На клетках инфицированных животных, которые могут явиться источником заражения человека, укрепляют карточки яркого цвета.

Животные, наиболее опасные с точки зрения возможности заражения окружающих, содержатся в изоляторе в металлических контейнерах или стеклянных банках в металлической оправе.

При уходе за животными, зараженными возбудителями особо опасных инфекций, персонал должен надевать по два халата, резиновый фартук, нарукавники, резиновые перчатки, очки, маску, сапоги. В особых случаях используют специальные костюмы.

В помещение, где содержатся инфицированные животные, разрешается входить только рабочим, обслуживающим животных, и научно-техническим сотрудникам, участвующим в опыте.

Трупы животных, погибших в ходе эксперимента, до вскрытия хранятся в специальном холодильнике (не более суток).

Вскрытие животных проводится экспериментатором. В случае гибели животного независимо от опыта на вскрытии присутствует представитель вивария.

Каждый случай падежа или вынужденного убоя животного фиксируется в специальном журнале по приводимой ниже форме.

Для предотвращения загрязнения окружающей среды трупы животных и биологические отходы до вывоза и сжигания должны храниться в морозильных камерах, закрытых контейнерах. Заразных животных сжигают под контролем ответственного лица в специальных печах. Трупы незаразных животных сдают в утильзавод в водонепроницаемых металлических ящиках с обязательным оформлением соответствующей документации.

Работа по уходу и содержанию лабораторных животных строится в соответствии с распорядком дня и регламентом работы, утвержденными руководителем учреждения. В распорядке дня предусматривается время для санитарной обработки помещения и оборудования, раздачи кормов и проведения экспериментальных работ.

В любом учреждении, где проводятся экспериментальные работы с лабораторными животными, приказом руководителя создается комиссия по биоэтике, которая решает вопросы правильного содержания и гуманного обращения с животными, осуществляет надзор и оценку программ по использованию и уходу за лабораторными животными, инспектирует виварии, оценивает помещения, где ведется работа с животными, представляет отчеты ответственным лицам учреждения, проводит экспертизу предлагаемых методов использования животных в научных исследованиях и анализах. Кроме того, комиссия рассматривает жалобы, касающиеся содержания и использования животных в учреждении. Учреждение несет ответственность за ведение журнала учета деятельности комиссии по биоэтике и за реализацию программы охраны труда и технике безопасности.

Биоэтика как самостоятельная область знаний выделилась относительно недавно. Способствовало этому обострение этических проблем, связанных с биологическими исследованиями, медицинской и ветеринарной практикой. В 1985 г. Советом международных медицинских научных организаций (СММНО) опубликован Этический кодекс, в который вошли «Международные рекомендации по проведению медико-биологических исследований с использованием животных». В кодексе сформулированы приемлемые для научных работников и для общественных групп защитников животных теоретические принципы и этические правила, которые могут быть приняты за основу при разработке регламентирующих мер и нормативных документов в различных странах мира в отношении использования животных для биологических исследований.

Эти принципы в основном отражены в «Правилах проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденных М3 СССР в 1977 г. Несмотря на то, что «Правила» были приняты задолго до публикации «Международных рекомендаций», большинство их положений не устарели и нуждаются лишь в корректировке с учетом требований международных норм. Наиболее полным и совершенным документом по использованию экспериментальных животных, учитывающим рекомендации этического кодекса, является Руководство по содержанию и использованию лабораторных животных, разработанное Институтом ресурсов лабораторных животных (ILAR — Institute of Laboratory Animal Resources; США). «Руководство» предназначено для широкой международной практики и содержит положения, приемлемые для организации содержания и использования животных в разных странах мира.

Квалификация и подготовка персонала. Для работы с животными (их содержание и использование) рекомендуется принимать лиц, имеющих соответствующую квалификацию. Персонал, работающий с животными, должен постоянно проходить обучение с целью повышения своей квалификации.

Исследователи, технический персонал, практиканты и временные сотрудники, осуществляющие анестезию, хирургические операции и другие манипуляции, должны быть обучены выполнению этих процедур гуманным и научно-обоснованным способом.

Порядок работы персонала, обязанности, меры безопасности, снабжение спецодеждой, дезинфицирующими средствами и др. должны быть жестко регламентированы соответствующими инструкциями.

Гигиена труда и безопасность персонала. В соответствии с требованиями Федерального закона «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения» от 30.03.99 г. №52-ФЗ, персонал проходит предварительные при поступлении на работу и периодические медицинские осмотры. К работе, связанной с содержанием и использованием животных, не допускаются носители патогенной микрофлоры и люди, страдающие аллергическими и кожными заболеваниями. Временно, до нормализации здоровья, к работе не допускаются больные инфекционными заболеваниями или сотрудники, имеющие повреждения кожи различной степени. При проведении на животных экспериментов с возбудителями, опасными для людей, обслуживающий персонал вивария подвергается профилактической иммунизации.

Все сотрудники должны соблюдать правила личной гигиены. Учреждение должно снабжать сотрудников одеждой, пригодной для использования в виварии, и обеспечивать ее чистоту. В распоряжение сотрудника выделяется индивидуальный шкаф с двумя отделениями. Одно из них предназначается для хранения в течение рабочего дня домашней одежды и обуви, которые необходимо снимать по приходе на работу; в другом отделении находится спецодежда. Верхнюю одежду, в которой сотрудники работают в помещениях, где находятся животные, нельзя носить за пределами вивария. При необходимости учреждение должно обеспечить сотрудников оборудованием и средствами индивидуальной защиты и принять другие меры безопасности. Индивидуальные шкафы периодически, не реже одного раза в месяц, дезинфицируются. Сотрудники должны мыть и дезинфицировать руки, принимать душ и менять одежду по мере необходимости для соблюдения правил личной гигиены и условий эксперимента.

Сотрудники не должны принимать пищу, пить, курить или пользоваться косметикой в помещениях, где находятся животные.

Для всех принимаемых на работу в виварий сотрудников проводится инструктаж по вопросам охраны труда и техники безопасности, правилам внутреннего распорядка в зависимости от выполняемой работы. Ответственность за проведение инструктажа возлагается на заведующего виварием.

Особенности техники безопасности при работе с животными. В таблице ниже представлен перечень основных наиболее часто встречающихся естественных инфекционных болезней животных, возбудители которых патогенны для человека.

Инфицирование сотрудников может происходить при уходе и наблюдении за животными, при различных манипуляциях с ними (термометрия, клиническое исследование, вскрытие, взятие материалов органов и тканей для различных исследований и др.), при уничтожении трупов павших и забитых животных.

Основными путями возможного заражения персонала являются: вдыхание воздуха, инфицированного выделениями больных животных, контакт с кровью, тканевыми жидкостями во время вскрытия и проведения необходимых исследований, укусы, царапины, наносимые больными животными; кроме того, заражение возможно через поврежденные кожные покровы или алиментарным путем.

За всеми лицами, имеющими отношение к уходу, обслуживанию, кормлению и различным исследованиям экспериментально зараженных животных, а также посещающими помещения, где такие животные находятся, устанавливается медицинское наблюдение. Обязательным условием является ежедневная термометрия.

При каких-либо особых ситуациях, в частности укусах и царапинах, нанесенных экспериментально зараженными животными, необходимо срочно обратиться к медицинскому работнику учреждения.

Правила кормления лабораторных животных. В экспериментальных исследованиях правильное содержание и кормление лабораторных животных как до, так и во время опыта имеют очень большое значение. Нарушение режима и рациона питания, несоблюдение санитарно-гигиенических мероприятий при кормлении способствуют ослаблению организма животных и повышению их восприимчивости к различным инфекционным и соматическим заболеваниям. Возникновение указанных заболеваний в течение опыта может привести к искажению результатов эксперимента и, следовательно, к неправильному заключению.

Потребность в питательных веществах для лабораторных животных хорошо изучена. Для правильной регуляции питания необходимо иметь представление о составе и ценности пищевых веществ.

Белки — необходимый компонент пищи для любого вида животных. Они содержат различные аминокислоты. Белки являются основным структурообразующим материалом и играют ведущую роль в осуществлении физиологических функций, служат источником восстановления и обновления оболочек клеток, образования ферментов, гормонов и др.

Жиры играют роль запасных питательных веществ. Они содержатся в различных тканях организма, защищают внутренние органы, служат теплоизолирующим материалом в подкожной жировой клетчатке. Биологическое значение жиров, содержащихся в корме, весьма велико. Они помогают всасыванию жирорастворимых витаминов, являются энергонасыщенным продуктом питания, формируют физиологически значимые для организма вещества: фосфолипиды, стерины, гормоны и др. Помимо жиров, получаемых с пищей, в организме теплокровных синтезируются жиры из промежуточных продуктов обмена.

Углеводы входят в состав пищи в виде полисахаридов — крахмала, гликогена, инулина, пектина, сахарозы и др. В процессе обмена веществ в организме они расщепляются на простые сахара и усваиваются, синтезируясь в полисахарид гликоген, который откладывается в качестве запасного вещества в печени. Гликоген может синтезироваться в организме грызунов и из других продуктов обмена веществ (жиров и белков).

Витамины — особая группа жизненно необходимых веществ, участвующая в обменных процессах организма. Они делятся на жирорастворимые (A, D, Е, К) и водорастворимые (группа В, С, Р, Н и др.).

Минеральные вещества, как и витамины, не являются пищевыми веществами, но необходимы организму для правильного функционирования его физиологических систем. Пополнение в необходимых количествах этих веществ происходит при потреблении корма и воды. При недостатке витаминов и минеральных веществ в кормах требуется их искусственное добавление в виде подкормок.

Несмотря на то, что грызуны считаются растительноядными животными, кормление их нельзя ограничить только кормами растительного происхождения. Для организации полноценного кормления требуются продукты животного происхождения (молоко, мясо, мясо-костная мука).

Главными составными частями рациона грызунов служат зерна пшеницы, овса, ячменя, ржи, проса. При кормлении зерном полезно чередовать виды или давать зерно в виде смесей. Дополнительным высокобелковым кормом является горох, который дают в дробленом виде. Зерна грызунам необходимы для стачивания резцов.

В рацион необходимо включать корне- и клубнеплоды, которые в природе служат для грызунов основным источником углеводов, витаминов и микроэлементов. Наиболее полноценным из сочных кормов является морковь. Она богата каротином, содержит мало клетчатки. Важны в рационе капуста и свекла. Можно давать картофель, как в сыром, так и в вареном виде. Однако он поедается хуже, чем морковь и капуста. В весенне-летне-осенний период необходимо давать разнообразную зелень — практически все злаки и разнотравье, исключая ядовитые и колючие растения. Зимой дают зелень проращенного овса. Это важный компонент, содержащий каротин. Кроме того, в зимний период дают сено. Помимо того, что сено— это пищевой продукт, оно является еще и объемистым кормом. Наиболее высокого качества — сено, скошенное до цветения трав.

Источником витаминов являются дрожжи, томатный сок, а также витаминные смеси, рыбий жир.

Хлористый кальций, мел, древесный уголь от лиственных пород деревьев необходимы как минеральная добавка. Минеральные подкормки нужны в любое время года. Они укрепляют кости и зубы.

Лабораторных животных рекомендуется кормить 2-3 раза в сутки в строго установленные часы, распределяя суточный рацион так, чтобы разные виды кормов чередовались в течение дня.

Животные должны получать доброкачественный корм, неконтаминированный патогенными микроорганизмами и плесневыми грибами. При необходимости зерновую смесь перед скармливанием стерилизуют в автоклаве при температуре 105 °С или в сухожаровом шкафу в течение 30 мин.

В последние годы для кормления лабораторных животных используют стандартизированные комбинированные корма в брикетах и гранулах. Они содержат необходимое для каждого вида животных количество белков, жиров, углеводов, минеральных веществ, витаминов, клетчатки.

Животные должны иметь постоянный доступ к воде. Бесперебойное обеспечение водой обязательно при использовании гранулированных сухих комбикормов. Вода должна соответствовать требованиям ГОСТ Р 51232-98.

Для поения лабораторных животных используют автоматические поилки. Примером самой простой автоматической поилки служит стеклянный флакон емкостью 250-500 мл с резиновой пробкой, в отверстие которой вставляется стеклянная или металлическая трубка-ниппель диаметром 6 мм. Поилку прикрепляют к боковой стенке клетки. Если автопоилок нет, то в клетках размещают обычные поилки открытого типа.

При составлении рационов питания нужно исходить из научно обоснованных норм кормления для каждого вида подопытных животных, утвержденных М3 СССР (приказ № 1179 от 10.10.83 г.).

- Читать далее "Подготовка лабораторных животных к опыту"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 9.08.2019