Изолированная вирусная РНК будет инфекционна в том случае, если геном вируса представлен единой молекулой нуклеиновой кислоты и вирусная РНК может функционировать в качестве информационной РНК. Это условие выполняется у вирусов, относящихся к двум большим семействам — Picornaviridae и Togaviridae.

Обширные исследования по подбору оптимальных условий определения инфекционности проведены с РНК вируса полиомиелита, представляющей собой линейную молекулу с мол. весом 2,6-106 дальтон. Один из чувствительных методов определения инфекционности (Кох и Бишоп, 1968) состоит в том, что суспензию клеток инкубируют с вирусной нуклеиновой кислотой, а затем помещают на монослой индикаторных клеток для определения числа инфекционных центров.

Чувствительность суспендированных клеток можно повысить, обработав их диметилсульфоксидом или поликатионами типа ДЕАЕ-декстрана, что иногда приводит к 10 000-кратному возрастанию инфекционности (Вахери, Пагано, 1965). Как одноцепочечная, так и двухцепочечная формы РНК вируса полиомиелита инфекционны. Более того, в присутствии поликатионов удельная инфекционность двухцепочечной РНК выше, чем инфекционность одноцепочечной вирусной РНК, что, возможно, объясняется устойчивостью двухцепочечной формы к клеточным рибонуклеазам.

Методы определения инфекционности свободной вирусной РНК не так эффективны, как методы определения инфекционности вируса полиомиелита. Несмотря на то что большая часть молекул РНК проникает внутрь клетки, о чем можно судить по переходу этой РНК в устойчивое к РНКазе состояние после периода адсорбции, определяемый уровень инфекционности РНК на несколько порядков ниже уровня инфекционности вируса.

Значение инфекционности вирусных нуклеиновых кислот. Открытие инфекционности ряда вирусных нуклеиновых кислот имеет важное теоретическое и практическое значение. Никакое другое свойство не показывает с такой очевидностью, что вирусный геном является хранителем всей генетической информации вируса.

Это свойство нуклеиновых кислот позволило расширить круг хозяев в лабораторных условиях; например, РНК вируса полиомиелита способна заражать клетки многих типов и животных, устойчивых к этому вирусу вследствие отсутствия у них специфичных для вирусного капсида рецепторов. Таким образом, «устойчивые» клетки на самом деле способны обеспечить размножение вируса при наличии механизма, облегчающего внедрение недеградированной РНК в клетку. Использование инфекционной ДНК. оказало большую помощь при анализе функций генома ряда вирусов, особенно SV40.

Безуспешные попытки показать инфекционность нуклеиновых кислот некоторых вирусов привели к обнаружению полимеразы, входящей в состав вирионов. Наконец, инфекционные вирусные нуклеиновые кислоты — удобная модель для изучения более общей проблемы, а именно введения функционально активных нуклеиновых кислот в клетки позвоночных. Несмотря на то что предпринятые ранее попытки переноса генов млекопитающих с помощью изолированной ДНК не были подтверждены, сфера возможного применения такого рода опытов необычайно расширилась в связи с сообщением о возможности репарации метаболических нарушений в клетке млекопитающих при введении необходимых генов с помощью ДНК трансдуцирующего бактериофага.

- Читать далее "Гемаглютинация вирусов. Прямой подсчет вирусных частиц"