Определение времени рекальцинации. Определение устойчивости плазмы к гепарину
Определение времени рекальцинации. Реактивы: 0,277% раствор хлористого кальция.
В пробирку, помещенную в водяную баню с температурой 37°, вводят 0,1 мл оксалатной плазмы, 0,2 мл раствора СаСl (0,277%) и через 30 секунд (по секундомеру) пробуют стеклянной палочкой образование сгустка.
Оксалатная плазма здорового человека при добавлении хлористого кальция свертывается в течение 60—120 секунд.
Определение устойчивости плазмы к гепарину. Реактивы: 1. Раствор гепарина: 1 ед. гепарина в 0,1 мл раствора.
2. 0,277% раствор хлористого кальция.
В маленькую пробирку, помещенную в водяной бане с температурой 37°, вводят 0,5 мл плазмы и 0,1 мл гепарина, через 60 секунд добавляют 1 мл 0,277% раствора хлористого кальция и включают секундомер. Отмечают время свертывания плазмы.
В норме 1 единица гепарина задерживает свертывание рекальцифицированной плазмы в течение 7—11 минут. При получении сгустка в течение такого же времени, как в рекальцифицированной плазме без введения гепарина, надо считать, что гепарина в данной крови нет либо его очень мало.
Определение глобулина-ускорителя. Реактивы: 1. Старая, 7—10-дневной давности, донорская плазма — плазма, свободная от глобулина-ускорителя.
2. Тромбопластиново-кальциевая смесь. Смешивают равные объемы тромбопластина и 0,555% раствор СаС12 (готовят перед исследованием).
В пробирку размерами 13Х100 мм вводят 0,1 мл старой донорской плазмы, 0,1 мл исследуемой плазмы, разведенной физиологическим раствором 1 : 20 и помещают ее в водяную баню при температуре 37° на 60 секунд; после этого быстро добавляют 0,1 мл тромбопластино-кальциевой смеси и по секундомеру определяют время свертывания плазмы.
Количество глобулина-ускорителя определяют по формуле: время свертывания плазмы здорового человека/время свертывания исследуемой плазмы • 100= глобулин-ускоритель %
Примечание: время свертывания плазмы здорового человека берется среднее, проверенное на пяти здоровых людях.
В норме через 5—6 часов после взятия из вены кровь в пробирке начинает свертываться, сгусток начинает отделяться от стенки и через 28—20 часов сгусток, уже совершенно отделившийся, окружен большим количеством сыворотки (1/3—1/2 количества взятой крови).
Сухую чистую градуированную пробирку с 8—10 мл взятой из вены крови оставляют на 24 часа при комнатной температуре, затем отмечают способность сгустка к сморщиванию (ретракции) по количеству образовавшейся сыворотки.
При тромбопении сыворотки выделяется мало — ретракция кровяного сгустка незначительная.
Реакция Матефи (Matefy). При некоторых заболеваниях происходит нарушение соотношения альбуминов и глобулинов в крови. Увеличивается количество глобулинов, которые легко выпадают в осадок.
К 0,2 мл сыворотки крови прибавляют 1 мл 0,05% раствора сернокислого алюминия (готовится из 0,5% раствора в момент употребления). Смесь взбалтывают и оставляют при комнатной температуре. В норме через 1,5—2 часа сыворотка становится мутной, иногда получается на дне пробирки хлопьевидный осадок. При нефрите, раке, активных процессах туберкулеза и др. осадок появляется через 20—30 минут.
- Читать далее "Осаждение белков крови. Методы осаждения белков крови"
Оглавление темы "Методы исследования крови":1. Предохранение крови от свертывания. Реакция оседания эритроцитов
2. Определение осмотической резистентности эритроцитов. Определение времени кровотечения
3. Определение времени свертывания крови. Определение ПТИ
4. Определение времени рекальцинации. Определение устойчивости плазмы к гепарину
5. Осаждение белков крови. Методы осаждения белков крови
6. Рефрактометрия для определения белков крови. Погружной рефрактометр Пульфриха
7. Определение небелковых тел крови. Определение альбуминов и глобулинов
8. Определение белковых фракций. Техника определения белковых фракций
9. Расчет белковых фракций. Реактивы для определения сахара крови
10. Техника определения сахара крови. Лабораторный метод определения глюкозы крови