Диагностика Stenotrophomonas maltophilia (возбудителя внутрибольничной инфекции)

Материал и этапы диагностики сходны с описанными для Pseudomonas aeruginosa. Чаще всего исследуют клинический материал дыхательного тракта, мочеполовой системы и кровь.

Ввиду небольшого количества выделяемых штаммов, в настоящее время трудно определить наиболее благоприятные условия изоляции Stenotrophomonas. Известно, однако, что успешное выделение проводилось с использованием плотных сред, содержащих свежую или прогретую кровь, а также цистин-лактозно-электролит-дефицитного агара, среды Мак-Конки. Выращивание проводят в течение ночи при 20-37 °С с аэрацией или при 5% СO2 Большинство содержащих кровь сред позволяют выделить S. maltophilia с высокой частотой.

С целью селективного выделения S. maltophilia применяют те же селективные среды, что и ранее, когда микроорганизм относили к Xanthomonas maltophilia, добавляя в них 6 антибактериальных агентов (цефалексин, бацитрацин, пенициллин G, новобиоцин, неомицин и тобрамицин), а также два антифунгальных агента (нистатин и циклогексамид). Чтобы идентифицировать колонии S. maltophilia, добавляют мальтозу и бромтимоловый синий, с помощью которых колонии приобретают оранжевый цвет с желтой каймой при образовании из мальтозы кислоты. На селективной среде Лидс S. maltophilia образует розовые морщинистые колонии с изрезанными краями.

Некоторые среды, успешно примененные для выделения микроба, содержали карбапенемы, к которым S. maltophilia природно устойчив. Имипинем, добавленный к кровяному агару или среде Мак-Конки (10-25 мкг/мл), способствовал выделению бактерии из образцов слюны и кала. Имипенем-содержащая среда, включающая метионин, успешно удовлетворяет потребности большинства штаммов микроба в этой аминокислоте. Однако среды, имеющие в качестве единственного селективного агента имипенем, не всегда способны ингибировать рост Enterococcus spp. или Candida spp.

Поэтому целесообразно дополнительно к имипенему использовать ванкомицин и амфотерицин В, а также систему «маннит-бромтимоловый синий». Такая среда показала высокие результаты при выделении микроба от пациентов с муковисцидозом и раком крови.

В клинической лаборатории S. maltophilia идентифицируют но стандартным биохимическим и другим тестам. Для предварительной идентификации можно использовать эффект синергизма между азтреонамом и клавулановой кислотой с использованием дисков с 30 и 10 мкг веществ, соответственно.

Несовершенство диагностики S. maltophilia (автоматизированной и неавтоматизированной) приводило к ложной идентификации этого микроба, ассоциируя его с такими микроорганизмами, как Bordetella bronchiseptica, Alcaligenes faecalis, Pseudomonas stutzen. Для диагностики используют газо-жидкостную хроматографию, масс-спектральный анализ, молекулярные методы и другие современные технологии. Однако молекулярные методы до настоящего времени не получили широкого применения. По различиям в последовательностях 16S и 23S рРНК проводят успешную дифференциацию S. maltophilia и Pseudomonas.

Для идентификации S. maltophilia используют коммерческие тест-системы: API 20Е, API 20NE, API rapid NFT, AutoSCAN W/A, Biolog, Biotest, Cobas Micro ID-E/NF, Crystal Enteric/Non-Fermenter, Minitek, Radiometer Sensititre AP80, RapidID NF Plus, Rosco, Titertek-NF, Uni-N/F Tek, Vitek AutoMicrobic.

Для эпидемиологических исследований и диагностики инфекций, обусловленных S. maltophilia, разработано множество схем типирования микроба. Эти схемы с разной степенью эффективности используются для исследования внутрибольничных вспышек. До недавнего времени чаще всего применялось серотипирование на основе термоустойчивых О-антигенов и типирование по липополисахаридам. Типирование путем сравнения антибиотикограмм находило лишь ограниченное применение из-за отсутствия заметных различий в признаках резистентности большинства штаммов. Также по причине слабой вариативности тестовых результатов практически не применяется биотипирование. Позднее техника генетического типирования привлекла к себе наибольшее внимание. Это были методы риботипирования, амплификация полиморфной ДНК, ПЦР и др.

Успешным методом для изучения эпидемиологии S. maltophilia оказался метод масс-спектромегрии.

Использование серотипирования при выделении возбудителя во время вспышки неидентифицированной инфекции в одном из отделений интенсивной терапии пациентов с травматическим шоком позволило в 86% выделить S. maltophilia серотипа 10. Микроорганизм изолировали из респирометров, трахеальных катетеров, вентиляционной системы, воды из крана, с рук медсестер. В других исследованиях окружающей среды в госпитальных учреждениях, среди которых были онкологические стационары, выявили серотипы 10, 3 и 19. Очень результативным оказались риботипирование, пульс-гель-электрофорез, ПЦР. Таким способом штаммы S. maltophilia типировали в Дании, Бразилии, Швейцарии, США, Канаде. Факторами передачи инфекции оказались водопроводные краны, насадки для душа, бронхоскопы.

- Читать далее "Лечение инфекции Stenotrophomonas maltophilia"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 17.4.2020

Все размещенные статьи преследуют образовательную цель и предназначены для лиц имеющих базовые знания в области медицины.
Без консультации лечащего врача нельзя применять на практике любой изложенный в статье факт.
Жалобы и возникшие вопросы просим присылать на адрес statii@dommedika.com
На этот же адрес ждем запросы на координаты авторов статей - быстро их предоставим.