а) Таксономия. Бактерии Providencia — самостоятельный род в семействе Enterobacteriaceae. Город Providence, где они впервые были выделены, — столица штата Род-Айленд, расположенного в северо-восточной части США. В прошлом эти бактерии относили к роду Proteus в качестве отдельного вида Р. inconstans. В настоящее время результаты изучения биохимических, антигенных свойств, данные геносистематики позволили рассматривать бактерии Providencia как самостоятельный род в семействе Enterobacteriaceae, включающий в себя также следующие виды: Providencia alcalifaciens, Р. stuartii, Р. rettgeri, Р. rustigianii, Р. heimbachae. Ультратонкий срез Р. alcalifaciens представлен на рисунке ниже.

Провиденции входят в состав транзиторной нормальной микрофлоры кишечника человека и животных, и могут присутствовать в окружающей среде в качестве сапрофитной микрофлоры. Бактерии рода Providencia могут вызывать тяжелые осложнения у больных с ожогами, после операций, явиться причиной пневмонии, бактериемии, острых гастроэнтеритов. Р. stuartii и Р. rettgeri нередко обнаруживали в моче госпитализированных больных после катетеризации мочевого пузыря. Эти виды часто оказываются причиной внутрибольничных инфекций.

б) Морфология и биохимические свойства. Провиденщш — грамотрицательные палочки; спор и капсул не образуют; как правило, подвижны; обладают способностью дезаминировать аминокислоты; не содержат декабоксилаз лизина и орнитина, не образуют сероводорода; мочевину гидролизуют только Р. rettgeri и некоторые представители Р. stuartii. Внутриродовая дифференциация возможна по признакам, представленным в таблице ниже.

Детальное изучение ферментативных свойств штаммов Providencia, выделенных из различных источников, позволило разным авторам дифференцировать исследованные штаммы на биотипы, что важно с эпидемиологической точки зрения. Так, в зависимости от способности образовывать газ из глюкозы и ферментировать адонит и инозит было определено два биотипа у Р. alcalifaciens и три у Р. stuartii. Неодинаковое отношение к салицину и рамнозе привело к выделению четырех биотипов Р. rettgeri.

Было показано, например, что штаммы Р. rettgeri, полученные от больных с хирургической, урологической патологией, дисфункцией желудочно-кишечного тракта, принадлежали главным образом к 4-му биотипу — не ферментировали ни салицин, ни рамнозу.

в) Факторы патогенности. Как и все энтеробактерии, провиденции обладают эндотоксином (ЛПС). Некоторые штаммы способны синтезировать фимбриальные адге-зины, различного тина энтеротоксины, разнообразные протеолитические ферменты, ДНК-азы, РНК-азы и др..

г) Лабораторная диагностика. Материалом для выделения бактерий рода Providencia может быть моча, фекалии, рвотные массы, пищевые продукты, кровь, отделяемое ран, генитального тракта и др. Исследуемый материал (кроме стерильных в норме жидкостей организма) сеют количественным методом, для чего после гомогенизации проб готовят десятикратные разведения в буферном фосфатном растворе. Бактериологическое исследование соответствует стандартной схеме.

Первый день. Приготовление разведений исследуемого материала и посев по 0,1 мл из разведений 10³, 10⁵ на чашки Петри с дифференциальными и селективными питательными средами: средой Эндо, Левина, агаром Плоскирева. Чашки Петри помещают в термостат при 37°С на 18-24 ч.

Второй день. Просматривают чашки, засеянные накануне. Подсчитывают число выросших колоний каждого вида. Отбирают подозрительные колонии для дальнейшего изучения. На среде Эндо Providencia образуют небольшие бледно-розовые прозрачные колонии, на агаре Плоскирева — колонии прозрачные с желтоватым оттенком. Для исследования отбирают не менее 3 однородных но виду колоний или 2-3 колонии каждого вида, если на чашках обнаружен разновидный рост.

Отобранные колонии (каждую отдельно) засевают петлей в полужидкий агар, под пробку пробирки помещают полоску индикаторной бумаги на индол; агар Клиглера (не забыть проткнуть столбик среды!), цитратный агар Симмонса, среду с мочевиной (посевы производят бактериологической петлей из одной пробирки в другую в указанном порядке, не прожигая петли). Посевы инкубируют в термостате при 37°С в течение 18-24 ч.

Третий день. Учитывают результаты ферментативной активности. Культуры, не ферментирующие лактозу, не продуцирующие сероводорода, образующие индол (индол-отрицательны только Р. heimbachae), не гидролизующие мочевину (уреазой обладают только Р. rettgeri и некоторые представители Р. stuartii), утилизирующие или не утилизирующие цитрат в качестве единственного источника углерода, подозрительны на принадлежность к роду Providencia. Для подтверждения родовой принадлежности и определения вида требуется провести дополнительные тесты: в первую очередь посев на фенилаланиновый агар и другие.

Четвертый день. Учитывают полученные результаты. При положительной реакции на фенилаланиновом агаре (появление темно-зеленого окрашивания при добавлении 10%-ного водного раствора FeCl₃) и по результатам дополнительных тестов определяют вид выделенных бактерий.

Как и при лабораторном исследовании других условно-патогенных энтеробактерий, при обнаружении бактерий одного вида в концентрации 10⁵ и более КОЕ/мл, они могут быть заподозрены в качестве этиологического агента.

д) Лекарственная чувствительность. Провиденции обычно чувствительны к канамицину и гентамицину, устойчивы ко многим антибактериальным препаратом, в частности, к полимиксину, цефалотину, тетрациклину. Приобретенная резистентность формируется в процессе лечения и зависит от тактики выбора и назначения препаратов. Полиантибиотикоустойчивые штаммы провиденций нередко являются причиной оппортунистических инфекций у иммунокомпрометированных больных. Чувствительность к антибиотикам определяют общепринятыми методами, чаще используют диско-диффузионный метод на среде АГВ или агаре Мюллера-Хинтона.

- Читать далее "Род условно-патогенных цитробактер (Citrobacter): морфология, культуральные, биохимические свойства"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 6.4.2020