И. В. Голубева, Б. С. Киселева, Ю. Л. Ратинер (1982) предложили следующий ход серологического титрования ЕРЕС:
1-й: Исследуемый материал, включая штамм бактерий, подлежащий серологическому оптированию, засевают на дифференциальную среду (Эндо, ЭМС) таким образом, чтобы получить рост изолированных колонии. Инкубация 18—20 ч при 37 °С.

2-й: Испытание в агглютинационном тесте на стекле части колонии со среды первичного посева с поливалентной ОК сывороткой широкого спектра действия — ОКА. Посев в две пробирки (со слабощелочным агаром и комбинированной средой для первичной идентификации) оставшейся части колонии, давшей положительную реакцию агглютинации (не менее чем на 3—4 креста).

3-й: Повгорное испытание выросших культур (с отрицательной реакцией на сероводород и мочевину) в агглютинациоииом тесте на стекле с сывороткой ОКА. Испытание культур, положительно реагировавших с поливалентной ОК-сывороткой или предпочтительно с ОК-иммуноглобулинами более узкого спектра действия — ОКВ, ОКС, ОКД, ОКЕ. Посев в пробирки минимального дифференцирующего ряда культур, давших положительную реакцию с одним из четырех поливалентных препаратов. Для определения подвижности и последующего типирования Н-антигена производят носев культуры глубоким уколом внутрь трубочки пробирки Крейджи с полужидким агаром. Инкубация 18—20 ч при 37 С.

4-й: При подтверждении принадлежности бактерий к эшерихиям проводят испытание в агглютинационном тесте на стекле с моновалентными ОК-сыворотками или иммуноглобулинами, входящими в поливалентную сыворотку, давшую положительную реакцию (живая культура, культура, прогретая 30 мин при 100 С. если таковые имеются. При наличии положительного результата реакции агглютинации с живыми и прогретыми культурами обозначают ОК группу изучаемого штамма в соответствии с использованными диагностическими препаратами. При отсутствии ОК-иммуноглобулинов и адсорбированных О-сывсроток подтверждают принадлежность культур к соответствующей ОК-группе в пробирочном агглютинационном тесте с возрастающими разведениями ОК-сыворотки до ее О титра, указанного на этикетке, в двух рядах пробирок (живая и прогретая 1 ч при 100С). Учет результатов осуществляют через 18—20 ч инкубации при 37 °С.

Пересев культуры с установленной или ориентировочно определенной ОК-группой иа глицериновый агар, скощенный в пробирке для типирования бактерий по Н-антигену в агглютинациинном тесте на стекле (при наличии соответствующих диагостических препаратов). Инкубация 18—20 ч при 37 °С.

5-й: Обозначение ОК-группы эшерихий при наличии положительного результата в соответствующей сыворотке агглютинации до титра или половины титра К-антител (с живыми бактериями) и О-антител (с прогретыми бактериями) . Серологическое типированне по Н-антигену культуры (с глицеринового агара) в агглютинационном тесте на стекле вначале в поливалентных, затем в моновалентных Н-сыворотках (входящих в соответствующую поливалентную, с которой реагировала культура). По со вокупности определенных разновидностей О-, К- и Н-антигенов устанавливают серовар штамма эшерихий.

При определении Н-антигена методом иммобилизации из пробирки с положительным результатом в поливалентной Н-сыворотка (рост бактерий только по ходу укола) производят посев культуры в пробирки, содержащие полужидкий агар и моновалеитвые Н-сывороткп. соответствующие поливалентной, давшей положительный результат иммобилизации. Инкубация 18—20 ч при 37 С

6-й: Учет иммобилизации культуры и при положительном результате обозначение соответствующего Н-антигена. По совокупности установленных разновидностей О-, К-, Н антигенов определение серовара штамма эшерихий.

При помощи коммерческих препаратов, выпускаемых в на шей стране, возможна идентификация ЕРЕС-штаммов 23 серо логических разновидностей ОК-грутш. включающих различное число сероваров.

- Читать "Эпидемиология эшерихий ЕРЕС. Определение эпидемиологических маркеров"