В нашей стране также были разработаны рекомендации по применению наиболее рациональных наборов дифференциально-диагностических тестов для дифференциации родов энтеробактерий. Наиболее известны рекомендации Всесоюзного центра по эшерихиям [Киселева Б. С, Голубева И. В., 1973, 1977]. В работе 1973 г. авторы рекомендовали одновременное использование минимального набора из 6 тестов, предусматривающего возможность определения родовой принадлежности на основании способности утилизировать цитрат в среде Симонса и малонат натрия, образовывать сероводород, гидролизовать мочевину, дезаминировать фенилаланин и по наличию или отсутствию подвижности.
Такой метод может быть оправдан в некоторых лабораториях при работе с поступающими для идентификации чистыми культурами.

Для практических бактериологических лабораторий, занимающихся выделением культур энтеробактерий на среды для первичной идентификации, более уместна предложенная теми же авторами в 1977 г. схема определения родов энтеробактерий, учитывающая при подборе необходимых тестов дифференцирующего ряда результаты, получаемые на комбинированных средах типа Олькеницкого или др. (образование сероводорода, гидролиз мочевины, ферментация лактозы и глюкозы с образо-нисм газообразных продуктов).

Тот же принцип подбора дополнительных дифференциальных тестов, исходя из результатов, полученных на комбинированных средах (по «ключевым биохимическим тестам»), реализован в рекомендациях, названных системой СУЛГ— сероводород, уреаза, лактоза, глюкоза (газ) в работах Л. М. Устименко и киевских авторов (1978).

Как указывалось в предыдущей статье нашего сайта, при выполнении исследований на энтеробактерий изолированные колонии выделяют с селективно-дифференциальной (пластинчатой) среды и пересевают в одну из комбинированных сред Таким путем определяют образование сероводорода, ферментацию глюкозы (включая газообразование), лактозы, сахарозы и гидролиз мочевины (на среде Олькеницкого). Следует, однако, помнить, что у бактерий трибы Klebsiellae гидролиз мочевины необходимо проверять на средах с мочевиной по Преусу или Кристенсену.

Культура, выросшая на комбинированной среде, может быть далее изучена с использованием всех тестов минимального дифференцирующего ряда или избирательно в необходимом в данном случае наборе.

Наборы тестов, входящих в минимальный дифференцирующий ряд, в рекомендациях разных авторов варьируют в отношении 2—3 компонентов, однако в основной части они совпадают и опыт отечественных и зарубежных исследователей свидетельствует об обоснованности их использования [Киселева Б. С, Голубева И. В., 1973; Андреева 3. М., Лавровская В. М. и др., 1983; Ewing W., 1973; Konernan E. et al„ 1979; Martin W., Washington J. II, 1980, и др.].

Приведенная далее схема дифференциации Enterobacteriaсеае с использованием комбинированных сред (Олькеницкого или Клиглера и мочевины по Преусу или Кристенсену, см. схему 1) преследует цель помочь бактериологу в выборе наиболее значимых биохимических тестов с учетом результатов, полученных на комбинированной среде. Применение указанной схемы в сочетании с рядом дополнительных признаков, очевидных уже на начальных этапах изучения некоторых культур (особенности колоний, образование пигмента, способность к роению и др.), позволяет сузить перечень предполагаемых родов и более рационально выбрать тесты для дальнейшей дифференциации.

Для подбора необходимых тестов используют специальные таблицы, а также характеристики соответствующих родов энтеробактерий, приведенные в руководстве, учитывая при этом значимость тех или иных конкретных тестов для идентификации определенных родовых групп. Так, когда в число рассматриваемых родов входит Proteus, особое место отводится тесту на фенилаланиндезаминазу (имеются публикации, свидетельствующие о корреляции результатов определения этого фермента с определением триптофаидезаминазы). В дифференциации Escherichia и Shigella первоочередными тестами являются ацетатный, цнтратный тест Кристенсена, а также определение подвижности. При определении представителей родов Hafnia и Yersinia учитывают изменение ряда признаков при различных температурах культивирования (22— 25 °С и 37°С).

- Читать далее "Среда Симонса. Определение подвижности культур бактерий"