Советуем для ознакомления:

Физиология:

Популярные разделы сайта:

Оценка распознования антигена. Оценка активации лимфоцитов

Для оценки процессов распознавания предложены следующие тесты:
• смешанная культура лимфоцитов (СКЛ);
• взаимодействие лимфоцитов с макрофагами, предварительно обработанными антигеном в системе in vitro:
• определение экспрессии молекул МНС класса II (презентация антигена);
• оценка образования цитокинов (ИФН-у, ИЛ-4 и др.) Т-клетками при распознавании специфического антигена;
• выявление специфических CD4+ и/или CD84 Т-лимфоцитов с использованием комплексов рекомбинантных молекул, обозначенных как тетрамеры (тетрамер МНС образуется при биотинилировании молекулы МНС и связывании их с четырехвалентной молекулой авидина), каждый из которых состоит из молекулы МНС класса I или II, нагруженной антигенным пептидом, и метки. В основе этого метода лежит прямое окрашивание антигенспецифических Т-клеток.

Для оценки активации лимфоцитов определяют:
• экспрессию лимфоцитами и другими клетками иммунной системы маркеров активации: CD25, CD69, CD71, HLA-DR и др.;
• внутриклеточные сигнальные молекулы лимфоцитов, в том числе внутриклеточную концентрацию ионов Са2+ экспрессию генов тирозин-киназ, протеинкиназу С, ядерные факторы транскрипции; активность НАДФН-оксидазы в нейтрофилах и моноцитах;
• уровень провоспалительных цитокинов (ФНО-а, ИЛ-1p, ИЛ-6, ИЛ-8 и др.) в сыворотке и биологических жидкостях;
• выработку провоспалительных цитокинов с участием рецепторов врожденного иммунитета (TLR и др.).

распознавание антигена

Если активация лимфоцитов блокируется до вступления в пролиферацию, то клетки подвергаются апоптозу и погибают. Такая массовая гибель активированных лимфоцитов лежит в основе феномена «апоптоза, индуцированного активацией». На этом основании была сформулирована концепция апоптогенных иммунодефицитов [Ковальчук Л.В., Чередеев А.Н., 1998].

С другой стороны, проблема усиленной активации иммунной системы становится одной из важнейших в патогенезе многих заболеваний человека, включая ВИЧ-инфекцию, многие воспалительные процессы и другие патологии. Оказалось, что следствие приобретенной гиперактивации иммунной системы — иммунодефицит.

Для исследования пролиферативной активности иммунокомпетентных клеток используют тесты на определение:
• пролиферативной активности лимфоцитов в ответ на митогены: фито-гемагглютинин, конканалин А, ЛПС и др.;
• пролиферативного ответа лимфоцитов на специфические антигены и аллергены.

По пролиферативному ответу лимфоцитов на стимуляцию фитогемаг-глютинином и конканалином А судят о функции Т-клеток; по ответу на стимуляцию ЛПС — о функции В-лимфоцитов, а на стимуляцию митогеном лаконоса — о взаимодействии между Т- и В-клетками.

Для оценки эффекторных функций иммунокомпетентных клеток используют тесты на:
• клеточную цитотоксичность (Т-киллеры, NK-клетки и др.);
• образование иммуноглобулинов в культуре В-лимфоцитов in vitro
• образование клетками иммунной системы иммуноцитокинов и ответ на них in vitro.

Цитотоксические тесты проводят, чтобы оценить способность Т-киллеров, NK-клеток, макрофагов убивать соответствующие клетки-мишени in vitro. Определение синтеза иммуноглобулинов в культуре антителообразующих клеток in vitro, а также в сыворотке — главные методы оценки функциональной активности В-лимфоцитов.

- Читать далее "Оценка иммунорегуляторного звена. Показатели иммунорегуляторного звена иммунитета"

Оглавление темы "Оценка иммунного статуса организма":
1. Оценка иммунной системы. Иммунный статус
2. Тесты для оценки иммунного статуса. Расширенное обследование иммунитета
3. Материалы для исследования иммунитета. Понятие нормальный иммунный статус
4. Оценка распознования антигена. Оценка активации лимфоцитов
5. Оценка иммунорегуляторного звена. Показатели иммунорегуляторного звена иммунитета
6. Этиологическая оценка иммунитета. Фенотипирование клеток иммунной системы
7. Оценка системы цитокинов. Этапы комплексной оценки системы цитокинов
8. Генно-молекулярные методы в иммунологии. Количественное определение цитокинов
9. Биологическое тестирование цитокинов. Нарушения в системе цитокинов
10. Иммунная система ребенка. Физиологическое иммунодефицитное состояние