Советуем для ознакомления:

Физиология:

Популярные разделы сайта:

Генно-молекулярные методы в иммунологии. Количественное определение цитокинов

Генно-молекулярные методы позволяют исследовать экспрессию генов цитокинов, их рецепторов, сигнальных молекул, а также изучать полиморфизм этих генов. Имеется связь между вариантами аллелей генов молекул цитокинов и предрасположенностью к ряду заболеваний. Изучение аллельных вариантов генов цитокинов может дать информацию о генетически запрограммированной продукции того или иного цитокина.

Наиболее чувствительным методом считают ПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ). Метод гибридизации in situ позволяет уточнить тканевую и клеточную локализацию генов цитокинов.

В настоящее время выявлен полиморфизм многих генов цитокинов и их рецепторов у человека. Так, среди группы провоспалительных цитокинов наиболее изучен полиморфизм генов семейства ФНО-а. Для гена ФНО-а описано несколько замен единичных нуклеотидов (англ. single nucleotide polymorphism — SNP), вызывающих количественные изменения функционирования гена.

Известны замены нуклеотидов в положениях -308 (G—>А) и -238 (G—>А) в зоне промоторных участков. В связи с наличием полиморфного аллеля (-308) эффективность транскрипции гена и образования ФНО-а возрастает в 3-5 раз, что при определенных условиях может способствовать более выраженному развитию системной воспалительной реакции.

иммунология

Полиморфное состояние гена не является патологией, но в некоторых ситуациях полиморфизм гена, наряду с другими факторами, может быть связан с чувствительностью или устойчивостью к иммунопатологии.

Количественное определение цитокинов в биологических жидкостях и в надосадочной жидкости культуры мононуклеарных клеток периферической крови методом иммуноферментного анализа (ИФА).

В биологических средах можно определить количественное содержание цитокинов с помощью целого ряда методов иммуноанализа, используя моноклональные и реже поликлональные антитела. ИФА позволяет определить точные концентрации цитокинов в самых разнообразных биологических жидкостях организма. При этом нужно иметь в виду, что для определения истинной концентрации цитокина в анализируемом образце необходима его стандартизация, например, в отношении уровня общего белка.

Иммуноферментное определение цитокинов имеет ряд преимуществ перед другими методами, а именно: обладает высокой чувствительностью, специфичностью, независимостью от наличия антагонистов, поддается точному автоматизированному учету и стандартизации. Однако и этот метод имеет свои ограничения. ИФА не характеризует биологическую активность цитокина и может давать ложные результаты за счет перекрестно реагирующих антигенных детерминант анализируемых образцов.

- Читать далее "Биологическое тестирование цитокинов. Нарушения в системе цитокинов"

Оглавление темы "Оценка иммунного статуса организма":
1. Оценка иммунной системы. Иммунный статус
2. Тесты для оценки иммунного статуса. Расширенное обследование иммунитета
3. Материалы для исследования иммунитета. Понятие нормальный иммунный статус
4. Оценка распознования антигена. Оценка активации лимфоцитов
5. Оценка иммунорегуляторного звена. Показатели иммунорегуляторного звена иммунитета
6. Этиологическая оценка иммунитета. Фенотипирование клеток иммунной системы
7. Оценка системы цитокинов. Этапы комплексной оценки системы цитокинов
8. Генно-молекулярные методы в иммунологии. Количественное определение цитокинов
9. Биологическое тестирование цитокинов. Нарушения в системе цитокинов
10. Иммунная система ребенка. Физиологическое иммунодефицитное состояние