H.G. Keizer и Н. Joenje исследовали клетки SW-1573, полученные из опухоли легкого человека и резистентные к доксорубицину, и обнаружили повышение рН, почти на 0,44 по мере возрастания уровня резистентности клеток к цитостатику (от 10 до 2000 раз). Примечательно, что повышенный рН, в наиболее резистентных клетках снижался до контрольного уровня после добавления в среду инкубации верапамила, который, как известно, тормозит активность Р-гликопротеина и тем самым «нивелирует» резистентность. Увеличенный рН, в клетках рака грудной железы человека, проявляющих множественную лекарственную резистентность, обнаружили R.C. Lyon и соавт., хотя имеются данные о том, что рН, в опухолевых клетках LoVo и Р388, резистентных к цитостатикам, ниже, чем в чувствительных «родительских» линиях.

Как уже отмечено, низкий рН снижает усвоение слабощелочных противоопухолевых препаратов и, таким образом, уменьшает их цитотоксичность. Этот феномен был обозначен как «физиологическая» резистентность к противоопухолевым препаратам, которые являются слабыми основаниями, в условиях in vivo. N. Raghunand и соавт. показали, что клетки рака грудной железы человека MCF-7 in vitro более чувствительны к доксорубицину, являющемуся слабым основанием, при рН 7,4, чем при рН 6,8. Обнаружено также, что повышение рНе ксенотрансплантатов MCF-7, достигаемое добавлением в питьевую воду мышам бикарбоната натрия, приводило к значительному усилению противоопухолевого эффекта доксорубицина.

N. Raghunand и соавт. провели также оценку влияния рН на усвоение и цитотоксичность слабых щелочей доксорубицина и митоксантрона in vitro и in vivo. Модуляция градиента рН внеклеточным подщелачиванием повышала in vitro усвоение клетками препаратов и цитотоксичность, как и предсказывала теория. Системное «подщелачивание» мышей с опухолями увеличивало эффективность обеих щелочей, хотя рН-опосредованные изменения концентрации доксорубицина во всем объеме опухоли были статистически недостоверны.

Возможность повышения эффективности противоопухолевой терапии с помощью подщелачивания опухоли исследовали W.Y. Wong и соавт., которые использовали для этого фермент уреазу, превращающий мочевину в аммоний, что сопровождается возрастанием рН окружающей среды. Было установлено, что уреаза способна оказывать как in vitro, так и in vivo прямое токсическое действие на клетки опухолей человека, в частности легкого и грудной железы. Показано, в частности, что введение уреазы в опухоль тормозило рост новообразования у «голых» мышей, по всей видимости, благодаря повышению внеклеточного рН опухоли. Авторы отметили также существенное усиление противоопухолевого эффекта доксорубицина и винбластина в этих условиях.

Множественная лекарственная резистентность опухолевых клеток проявляется при изменении градиента рН на границе различных клеточных компартментов, что благоприятствует уменьшению внутриклеточного накопления противоопухолевых препаратов и снижению терапевтического эффекта. Е. Miraglia и соавт. наблюдали, что активность и экспрессия NaVFP-антипорта, вовлеченного в гомеостаз внутриклеточного рН, увеличены в доксорубицинрезистентных клетках карциномы толстой кишки человека по сравнению с доксорубицинчувствительными клетками. Внутриклеточный рН был значительно выше в резистентных клетках, которые накапливали меньше доксорубицина, чем чувствительные. Ингибитор NaVFT-антипорта амилорид значительно снижал внутриклеточный рН и увеличивал внутриклеточное накопление доксорубицина в обоих типах клеток.

Наряду с этим, монензин — ионофор, который мимикрирует действие обменника, значительно повышал внутриклеточный рН и уменьшал накопление лекарства. Предполагается, что в клетках с феноменом множественной лекарственной резистентности цитозольный рН выше и связан с уменьшением накопления лекарства. Такая резистентность может быть снята торможением активности обменника, что указывает на возможность клинического применения его ингибиторов.

- Читать далее "Роль Р-гликопротеина в развитии резистентности опухоли к цитостатической терапии"