Определение остаточных количеств пирантел тартрата в органах и тканях овец, леченных пирителом, проводили методом тонкослойной хроматографии, стандартизированным R. Gauch et al. (1983), Т.С. Новик, Н.Н. Савченко (1986) для изучения фармакокинетики пирантел тартрата в организме животных.

Изучение сроков выведения пирантел тартрата из организма овец провели на 18 цигайских валухах в возрасте 10-12 мес, спонтанно инвазированных стронгилятами пищеварительного тракта. Пирител фирмы «ЛЕК» (Словения) задавали овцам индивидуально перорально однократно в рекомендованной фирмой терапевтической дозе 25 мг/кг по ДВ из расчета 2 г 12,5%-ного порошка на 10 кг массы тела. Двум контрольным валухам препарат не назначали. Животных по 3 головы убивали через 1,3, 5, 7, 10 и 14 сут после введения препарата. Для исследований на содержание пирантел тартрата после убоя овец брали кусочки печени, почек, мышечной и жировой ткани (околопочечной), легких, а также кровь, желчь и фекалии. До исследования пробы органов и тканей хранили в холодильнике при температуре - 20 °С.

Принцип метода основан на экстракции пирантел тартрата из тканей 0,1 Н раствором соляной кислоты, обезжириванием экстракта путем вымораживания на холоде, очистке экстракта рядом перераспределений между различными растворителями и хроматографирование в тонком слое силикагеля на пластинках «Силуфол».
Определяемость метода 85%, чувствительность - 0,05 мг/кг.

Растворители и реактивы: ацетон х.ч.; натрий сернокислый безводный; 0,1 Н HCL; хлористый натрий; этиловый эфир; гексан; 1%-ный раствор FeCl3; ацетонитрил; стандартный раствор пирантел тартрата (42,8 мг в 1 л метанола).

Приборы и посуда: камеры для хроматографирования; аппарат для выпаривания растворов; пластинки для хроматографирования «Силуфол»; весы аналитические; делительные воронки на 50 мл; химические мерные цилиндры на 100 мл; конические колбы с притертой пробкой на 250 мл; плоскодонные колбы на 250 и 40 мл; микропипетки на 100 и 200 мкл; водяная баня; аппарат для встряхиванияя; ротационный аппарат.

Ход анализа: измельченную ткань животного происхождения (навеска 10-20 г) помещают в колбу на 250 мл, добавляют 1 мл 0,1 Н HCL и 30 мл ацетона и помещают при периодическом помешивании при 40-50 °С в водяную баню на 30 мин. Экстракт декантируют через бумажный фильтр, помещая в колбу на 250 мл и обезжиривают путем вымораживания. Переэкстракцию проводят путем добавления 0,1 Н HCL, 0,25%-ного раствора хлористого натрия, этилацетата. Верхнюю фазу органического растворителя отделяют, предварительно освободившись от водной фазы путем добавления 5 мл этилацетата (пирантел тартрат переходит в этилацетат).

Далее проводят хроматографирование в условиях двухмерной тонкослойной хроматографии. Первая система - эфир : гексан, вторая - ацетон : гексан. Окрашивают хроматограмму FeCl3 и помещают на 15 мин в сушильный шкаф при 60 °С для выявления пятен фиолетового цвета.

Количественное определение пирантел тартрата проводят путем измерения площадей и измерения количества препарата (мкг) по калибровочному графику, предварительно построенного, исходя из заведомо известных концентраций препарата. Кроме того, определение пирантел тартрата возможно путем сравнения площадей пятен пробы и стандарта.

- Читать далее "Хлорированные углеводороды в тканях. Определение фенасала в органах и тканях"