Если испражнения доставлены без консерванта, их суспендируют в изотоническом растворе натрия хлорида в соотношении 1:10. На высокоселективных средах количество посевного материала необходимо увеличить в 3—5 раз но сравнению сослабоселективными средами. В среду обогащения испражнения вносят в соотношении 1:5 и тщательно перемешивают. Пробирки с посевами помещают в термостат, а по окончании инкубации делают высевы на плотные селективно-дифференциальные среды.

Кровь. После посева крови, выполненного как указано выше, и инкубации в термостате трехкратно делают высев (ежедневно) на плотные среды Эядо, ЭМС или слабощелочной агар, а при отрицательном результате — еще на 6-е и 10-е сутки.

При посеве рвотных масс и промывных вод желудка с целью накопления возбудителя используют соответствующие-среды двойной концентрации при соблюдении соотношения засеваемого материала и среды 1 : 1

Желчь (дуоденальное содержимое) засевают во флаконы с 50мл питательного бульона в соотношении 1 : 10 и на плотные селективно-дифференциальные среды. Оставшуюся желчь также помещают в термостат.

Гной, пунктаты органов, экссудат, слизь из зева и носа, мокроту, отделяемое цервикального канала матки засевают в жидкие и плотные питательные среды для обогащения и выделения. Спинномозговую жидкость центрифугируют и осадок засевают на питательные среды для обогащения и выделения.
Соскоб с розеол засевают, как указано выше, в среду обогащения.

Операционный материал — содержимое удаленного червеобразного отростка или кусочек другого органа (ткани), желчного и мочевого пузыря исследуют, как испражнения, желчь и мочу соответственно.
Женское грудное молоко засевают в жидкие н плотные питательные среды для обогащения и выделения.

Методика отсева колоний имеет большое значение для получения чистой культуры бактерий. Колонию следует снимать малой бактериологической петлей или иглой, прикасаясь к поверхности колонии в центре. Охлаждать петлю или иглу прикосновением к визуально свободной от роста поверхности питательной среды нельзя, ибо следует помнить, что на селективных для шигелл и сальмонелл агаровых средах эшерихии н другие энтеробактерии растут плохо, часто не способны ферментировать лактозу и формировать визуально выявляемые колонии. Поэтому при изоляции колоний, подозрительных на патогенные энтеробактерий, рядом лежащие колонии других микроорганизмов одной петлей могут быть перенесены в среды для биохимической идентификации, где сапрофиты, не подвергаясь более селективному подавлению, нормально развиваются, образуя тем самым смешанную культуру и обусловливая ложные результаты биохимических тестов.

Одним из эффективных вспомогательных методов при определении чистоты культуры и ориентировочного распознавания колоний может служить метод микроскопии колоний в косопроходящем свете по Landy (1950). Для этой цели испытуемую культуру рассевают по поверхности чашки с питательным агаром так, чтобы обеспечить рост изолированных колоний. Принцип методики изучения колоний при косом освещении отличается от обычного метода микроскопии тем, что объект рассматривают не в проходящем свете, а освещенным косо направленным лучом, обусловливающим цветное окрашивание рассматриваемых колоний и выявление строения их поверхности. Этого эффекта достигают с помощью зеркальца от бинокулярной лупы или микроскопа, помещенного на столе между лупой и осветителем вогнутой стороной вверх и слегка повернутого так, чтобы обеспечить угол падения луча 41—42 С.

Зеркальце помещают на равном расстоянии (12—14 см) между осветителем и центром предметного столика лупы. Для удобства работы зеркальце зажимают специальным устройством. Используют увеличение Х40, При правильной установке узкий пучок света от лампы осветителя с помощью зеркала должен освещать скользящим светом центр чашки с посевом, где создается наиболее правильное освещение.

- Читать далее "Отсев молодых колоний энтеробактерий. Цветное свечение колоний"