Поляризационная микроскопия и иммунофлюоресцентное исследование кожи. Особенности
Поляризационная микроскопия. В комплектацию большинства световых микроскопов входят поляризационные фильтры, вращая которые можно изучать объект в поляризованном свете. Светопреломляющие инородные структуры, например частицы крахмала, шовный материал или кристаллы уратов в поляризованном свете ярко светятся.
Поляризационную микроскопию используют для выявления амилоида в препаратах, окрашенных конго красным, а также для исследования гранулематозных реакций.
Иммунофлюоресцентное исследование кожи
Иммунофлюоресцентное исследование используют для выявления и определения локализации антигенов в биоптатах кожи (прямая иммунофлюоресценция) и выявления специфических антител в сыворотке (непрямая иммунофлюоресценция). В дерматологии это исследование чаще всего применяют в диагностике пузырных дерматозов.
Для прямой иммунофлюоресценции биоптат (обычно размером 3—4 мм) лучше всего получать из участков, скрытых от прямого солнечного света (например, с внутренней поверхности рук). Можно также получить образец нормальной ткани из участка, расположенного не ближе чем в 2 см от границы поражения. Полученные образцы ткани лучше всего поместить в среду Michel или заморозить в жидком азоте.
Формальдегид в данном случае не используют, поскольку он разрушает антигены, затрудняя их выявление. После приготовления срезов их инкубируют с антителами к антигену, меченными флюорохромом, который под действием ультрафиолетового излучения испускает свет определенного цвета. Так, флюоресцеип дает зеленое свечение и обычно используется для выявления антигенов, а родамин испускает красно-оранжевое свечение и служит для окрашивания ядер кератиноцитов.
Это исследование используется также при дискоидной красной волчанке с прогностической целью (тест волчаночной полоски). Выявление отложений одного или нескольких антигенов (кроме IgM) на базальной мембране в участке кожи, защищенном от прямого солнечного света, говорит о высокой вероятности системного характера болезни. В последние годы тест волчаночной полоски используется все реже.
При непрямой иммунофлюоресценции сыворотку больного инкубируют с клеточным субстратом (например, с препаратами пищевода обезьян, крайней плоти человека или мочевого пузыря крыс), чтобы присутствующие в ней антитела связались с эпителием. Для выявления связавшихся антител используют антитела к иммуноглобулинам человека, меченные флюорохромом. Оценку результатов проводят, как описано выше. Этот метод чаще всего используется при буллезном пемфигоиде и пузырчатке.
При пузырчатке, в отличие от буллезного пемфигоида, титр антител соответствует активности заболевания. Чтобы отличить буллезный пемфигоид от приобретенного буллезного эпидермолиза, сыворотку больных инкубируют с препаратом из расщепленного (путем инкубации в растворе NaCI) кожного лоскута.
В небольших клиниках с целью экономии дорогостоящих реактивов иммунофлюоресцентное исследование часто проводят на предметных стеклах с серией фиксированных клеточных субстратов. Однако в таких случаях исследование приходится проводить не чаще чем один раз в 2—4 нед., поэтому его результаты часто бывают готовы значительно позднее, чем результаты гистологического исследования.
- Читать "Иммуноферментное (ИФА) и молекулярно-биологическое исследования в дерматологии. Особенности"
Оглавление темы "Дерматология":- Сбор, хранение, маркировка биопсийных тканей. Рекомендации
- Обработка биопсийного материала. Рекомендации
- Исследование гистологии биопсийного материала. Рекомендации
- Особенности различных участков кожи в норме. Различия
- Признаки патологии эпидермиса. Особенности
- Признаки патологии дермы и подкожной клетчатки. Особенности
- Цитологическое исследование кожи. Признаки рака
- Поляризационная микроскопия и иммунофлюоресцентное исследование кожи. Особенности
- Иммуноферментное (ИФА) и молекулярно-биологическое исследования в дерматологии. Особенности
- Причины псориаза. Распространенность