а) Микробиологическая диагностика. Для бактериологического исследования используют кровь больного, а также подкожный экссудат, взятый с места воспаления иглой, соединенной со шприцем.

В качестве основных питательных сред для выделения и культивирования Е. rhusiopathiae используются сывороточные мясопептонный бульон (МПБ) и мясопептонный агар (МИД). Для приготовления сывороточного МПБ в пробирки с 5,0 мл бульона стерильно добавляют по 0,25 мл (5%) нормальной лошадиной или бычьей сыворотки. Для приготовления сывороточного МПА к расплавленной и остуженной до 45°С агаровой основе стерильно добавляют 5% нормальной лошадиной или бычьей сыворотки. Смесь тщательно перемешивают и разливают в чашки Петри и пробирки (для получения «скошенного» агара).

Кровь и подкожный материал сразу после взятия засевают на сывороточный МПБ в качестве среды обогащения. Подкожный материал добавочно высевают в чашки Петри с сывороточным МПА и 5% кровяным агаром. Посевы инкубируют в аэробных условиях (лучше при содержании 5-10% СО₂ в атмосфере) в течение 18-24 ч. Из бульонной культуры, а также из мелких росинчатых подозрительных колоний с агаровых сред готовят препараты-мазки, окрашенные по Граму. Если мазках из колоний оказались грамположительные палочки, напоминающие Е. rhusiopathiae, колонии отсевают в пробирки с сывороточными МПА и МПБ для получения чистых культур и их идентификации.

У чистой культуры, типичной по морфологическим и культуральным свойствам для Е. rhusiopathiae, определяют продукцию каталазы, сероводорода, гемолитическую активность, способность гидролизовать эскулин и углеводы на средах Гисса, характер роста на столбике МПЖ. Бульонную культуру в объеме 0,5 мл вводят подкожно (в область спины) трем белым беспородным мышам массой 16-18 г или в грудную мышцу голубю.

Диагноз эризинелоида считается установленным, если из крови или подкожного материала с места воспаления выделен грамположительный микроорганизм, имеющий вид тонких прямых, длинных палочек, который в бульоне вызывает равномерное помутнение и образует серо-белый осадок, при встряхивании разбивающийся в равномерную со световыми переливами суспензию («муаровые волны»), а на агаре формирует типичные мелкие колонии.

Микроорганизм обильно образует сероводород, проявляет альфа-гемолитическую активность не ранее чем через 48 часов инкубации, не имеет каталазы, не гидролизует эскулин, но ферментирует до кислот глюкозу, лактозу, левулезу и галактозу. Суточная бульонная культура, веденная в объеме 0,5 мл подкожно мышам, вызывает их гибель в течение 2-4 сут. При внутримышечном введении данной культуры голубю он погибает в течение 1 -3 сут. Из крови, взятой из сердца мышей и голубя, выделяется чистая культура возбудителя.

Исследование проводится по следующему графику.

Первый день. Высев крови и подкожного материала на сывороточный МПБ, посев подкожного материала на сывороточный МПБ, сывороточный МПА и кровяной агар в чашках Петри.

Второй день. Микроскопия мазков, окрашенных по Граму, из бульонных культур и из морфологически подозрительных колоний. Отсев из отобранных колоний, содержащих характерные грамположительные палочки, с агаровых сред на сывороточный МПБ и МПА в пробирках для получения чистых культур, на кровяной агар — для определения гемолиза, и на столбик МПЖ. Посев на МПЖ оставляют при комнатной температуре на несколько дней. В горлышко пробирки с засеянным сывороточным МПБ вставляют полоску фильтровальной бумаги, смоченной уксусно-кислым свинцом, для улавливания сероводорода.

Высев на сывороточный МПА и кровяной агар из бульонных культур (со спецобогащения) с посевами крови и подкожного экссудата.

Третий день. Просмотр мазков, окрашенных по Граму, из чистых агаровых и бульонных культур. Изучение роста чистой культуры на сывороточном МПБ («муаровые волны»). Посев чистой агаровой культуры на среду с эскулином, среды Гисса с глюкозой, левулезой, лактозой и галактозой. Постановка теста на каталазу. Учет теста на образование сероводорода.
Заражение чистой бульонной культурой мышей или голубя.

Изучение роста колоний на агаровых средах в чашках Петри, куда на второй день были высеяны бульонные культуры посевов крови и подкожного материала. Отсев подозрительных колоний в пробирки с сывороточными МПБ и МПА для дальнейшего изучения по схеме 2-5-го дней.

Четвертый день. Учет ферментативной активности культуры на среде с эскулином и средах Гисса. Учет продукции альфа-гемолизина на 5% кровяном агаре. Учет результатов биопроб (если животные погибли).

Пятый, шестой, седьмой дни. Учет характера роста изучаемых культур на МПЖ. Учет биопроб. Посев крови из сердца павших животных и выделение культуры Е. rhusiopathiae по вышеуказанной схеме. Обобщение результатов. Выдача окончательного ответа.

б) Лечение и профилактика. Больным назначают пенициллин каждые 3-4 ч, причем две первые инъекции делают в двойной дозе (по 200-300 тыс. ЕД). Эффективны подкожные инъекции пенициллина с раствором новокаина в две-три точки выше места поражения кожи. Как правило, одной серии таких подкожных инъекций (при продолжении внутримышечных введений пенициллина) бывает достаточно, чтобы воспалительные явления кожи и подкожной клетчатки начали исчезать.

При ранении кожи во время контакта с заведомо больным животным необходимо провести дезинфекционную обработку раны и экстренную профилактику пенициллином. Специфическая профилактика эризипелоида не разработана, однако имеются данные, что при вспышке рожи у дельфинов, содержащихся в неволе, применение живой вакцины оказало положительное действие.

- Читать далее "Возбудитель туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis, МБТ): таксономия"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 4.12.2019