Основные требования к иммунодиагностике инфекционных заболеваний методом ИФА

1. Определять различные классы специфических антител. Приступая к иммунодиагностике, необходимо знать серологический профиль инфекционного заболевания, так как в серонегативный период все ИФА-исследования, направленные на выявление специфических Ат, будут отрицательными.

При выраженной клинической картине заболевания специфические IgM Ат могут свидетельствовать об острой инфекции. При выявлении только IgG Ат невозможна однозначная интерпретация. Поэтому для решения иммунодиагности-ческих задач требуется комплексное исследование специфических Ат всех классов иммуноглобулинов. Так, если специфические IgG Ат выявляются в высоких титрах одновременно с IgM Ат или их титры четырехкратно нарастают при иммуномониторинге в течение 2 недель, то существует большая вероятность подтверждения диагноза.

Если же IgM Ат не выявлены, a IgG Ат обнаруживаются в постоянных титрах и при этом отсутствует клинико-лабораторная картина заболевания, то можно сделать предположение о наличии специфического иммунитета, сформировавшегося у обследуемого пациента либо после перенесенного в прошлом заболевания, либо после вакцинации. Присутствие IgG Ат может отражать латентную инфекцию или характеризовать хроническое заболевание. Доказано, что при обострении хронического инфекционного процесса на фоне наличия IgG Ат выявляются и специфические IgA Ат.

2. Использовать подтверждающие тест-системы. При получении ИФА+ результата при скрининговом исследовании его необходимо верифицировать в более чувствительных и специфичных тест-системах «Вестернблот» или каких-либо других, где на твердой фазе локализованы Аг, специфичные для высоковирулентных штаммов. Отсутствие Ат к специфическим Аг будет свидетельствовать о ложноположительном результате.

3. Проводить иммуномониторинг. Каждая инфекция имеет свой серологический профиль, который характеризуется появлением в динамике заболевания разных классов Ат к отдельным Аг микроба. Во избежание как ложноотрицательных, так и ложноположительных результатов необходимо выполнить несколько исследований методом парных сывороток, т. е. одновременно проанализировать предыдущую и свежую сыворотки с интервалом в 2 недели. Достоверное нарастание или падение концентрации специфических Ат будет свидетельствовать об инфекционном процессе.

4. Проводить исследование выработки сенсибилизированными лимфоцитами интерлейкинов под действием антигенной стимуляции in vitro. В настоящее время для чувствительной и специфической иммунодиагностики туберкулеза — инфекции, контролируемой Т-клеточным звеном иммунитета, недостаточно определять только Ат. Необходимо использовать методологию ELISPOT для выявления гамма-интерферона, вырабатываемого сенсибилизированными Т-лимфоцитами под действием специфического Аг M.tuberculosis в системе in vitro.

Основные требования к иммунодиагностике инфекционных заболеваний методом ИФА

- Читать далее "Идентификация микроорганизмов с использованием коммерческих микротест-систем"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 4.09.2019

Остались вопросы или замечания?

Все размещенные статьи преследуют образовательную цель и предназначены для лиц имеющих базовые знания в области медицины.
Без консультации лечащего врача нельзя применять на практике любой изложенный в статье факт.
Жалобы и возникшие вопросы просим присылать на адрес statii@dommedika.com
На этот же адрес ждем запросы на координаты авторов статей - быстро их предоставим.