Качество изображения в значительной мере зависит от правильного освещения. Наиболее распространенным способом освещения препарата является освещение по Келеру.

Этапы освещения по Келеру с использованием внешнего источника света:

1. Свет направляют на плоское зеркало микроскопа.

2. Помещают препарат на предметный столик микроскопа.

3. Закрывают зеркало микроскопа листом белой бумаги и фокусируют на нем изображение нити лампы, передвигая патрон лампы в осветителе. Убирают бумагу с зеркала.

4. Закрывают апертурную диафрагму (ограничивает световой поток) конденсора. Перемещая зеркало и слегка передвигая патрон лампы, фокусируют изображение нити на апертурной диафрагме конденсора. Расстояние осветителя от микроскопа должно быть таким, чтобы изображение нити лампы было равно диаметру апертурной диафрагмы конденсора (наблюдать апертурную диафрагму можно при помощи плоского зеркала, помещенного с правой стороны основания микроскопа).

5. Раскрывают апертурную диафрагму конденсора, уменьшают отверстие полевой диафрагмы осветителя и значительно уменьшают накал лампы.

6. При малом увеличении (10х) с «сухим» объективом, глядя в окуляр, при помощи фокусировки получают резкое изображение препарата.

7. Слегка поворачивая зеркало, переводят изображение полевой диафрагмы, которое имеет вид светлого пятна, в центр поля зрения. Опуская и поднимая конденсор, добиваются получения резкого изображения краев полевой диафрагмы в плоскости препарата (вокруг них может быть видна цветная каемка). При помощи центровочных винтов конденсора приводят в ценр поля зрения изображение полевой диафрагмы.

8. Раскрывают полевую диафрагму осветителя до краев поля зрения микроскопа, увеличивают накал нити лампы и слегка (на 1/3) уменьшают раскрытие апертурной диафрагмы конденсора.

9. При смене объектива необходимо проверить настройку света. После окончания настройки света по Келеру нельзя изменять положение конденсора, раскрытие полевой и апертурной диафрагмы. Освещенность препарата можно регулировать только нейтральными светофильтрами или изменением накала лампы при помощи реостата. Излишнее открытие апертурной диафрагмы конденсора может привести к значительному снижению контрастности изображения, а недостаточное — к значительному ухудшению качества изображения (появлению диффракционных колец).

Для проверки правильности раскрытия апертурной диафрагмы необходимо удалить окуляр и, глядя в тубус, открыть ее таким образом, чтобы она закрывала светящееся поле на одну треть. Для правильного освещения препарата при работе с объективами малого увеличения (до 10х) необходимо отвинтить и снять верхнюю линзу конденсора.

При работе с микроскопом нельзя прилагать большие усилия и касаться пальцами поверхности линз, зеркал и светофильтров. Чтобы предохранить внутренние поверхности объективов и призмы тубуса от попадания пыли, необходимо всегда оставлять окуляр в тубусе. Чистка внешних поверхностей линз включает удаление с них пыли мягкой кисточкой, промытой в эфире. Если необходимо, осторожно протирают поверхности линз хорошо выстиранной, не содержащей остатков мыла полотняной или батистовой тряпочкой, слегка смоченной чистым бензином, петролейным эфиром или специальной смесью для чистки оптики.

Не рекомендуется протирать оптику объективов ксилолом, так как это может привести к их расклеиванию. С зеркал, имеющих наружное серебрение, можно только сдувать пыль при помощи резиновой груши. Протирать их нельзя. Нельзя также самостоятельно развинчивать и разбирать объективы — это приведет к их порче. По окончании работы с микроскопом необходимо тщательно удалить остатки иммерсионного масла с фронтальной линзы объектива указанным выше способом. Затем опустить предметный столик (или конденсор в микроскопах с неподвижным столиком) и накрыть микроскоп чехлом. Внешний вид микроскопа сохраняют путем периодического протирания его мягкой тряпкой, слегка пропитанной бескислотным вазелином, а затем сухой мягкой чистой тряпкой.

- Читать далее "Фазово-контрастная микроскопия и настройка фазового контраста"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 9.05.2019