Темнопольная микроскопия и настройка темнопольного освещения

Темнопольная микроскопия применяется для изучения неокрашенных объектов, в частности микробов, которые в живом состоянии слабоконтрастны и не выявляются в светлом поле. Она основана на способности микроорганизмов сильно рассеивать свет. Для темнопольной микроскопии пользуются обычными объективами и специальными темнополъными конденсорами, центральная часть которых затемнена, и прямые лучи от осветителя в объектив микроскопа не попадают.

Объект освещается косыми боковыми лучами, и в объектив микроскопа попадают только лучи, рассеянные частицами, находящимися в препарате. Темнопольная микроскопия основана на эффекте Тиндаля, известным примером которого служит проявление пылинок в воздухе при освещении их узким лучом солнечного света. Чтобы в объектив не попадали прямые лучи от осветителя, апертура объектива должна быть меньше, чем апертура конденсора. Для уменьшения апертуры в обычный объектив помещают диафрагму или пользуются специальными объективами, снабженными ирисовой диафрагмой.

При темнопольной микроскопии микроорганизмы выглядят ярко светящимися на черном фоне. При этом могут быть обнаружены мельчайшие микроорганизмы, размеры которых лежат за пределами разрешающей способности микроскопа. Однако темнопольная микроскопия позволяет увидеть только контуры объекта, но не дает возможности изучить его внутреннюю структуру.

При помощи темнопольной микроскопии изучают препараты типа «раздавленная капля». Предметные стекла должны быть не толще 1,1-1,2 мм, покровные — 0,17 мм, без царапин и загрязнений. В приготовленном препарате не должно быть пузырьков и крупных частиц (эти дефекты видны как ярко светящиеся образования, не позволяющие наблюдать детали объекта). Для темнопольной микроскопии применяют более мощные осветители и максимальный накал лампы.

Устройство микроскопа
Принципиальная схема микроскопа и осветительной системы:
1 — источник света; 2 — коллектор; 3 — ирисовая полевая диафрагма; 4 — зеркало; 5 — ирисовая аппертурная диафрагма;
6 — конденсор; 7 — препарат; 7' — увеличенное действительное промежуточное изображение препарата, получаемое при помощи объектива; 7" — увеличенное мнимое окончательное изображение препарата, наблюдаемое через окуляр;
8 — объектив; 9 — выходной значок объектива; 10 — полевая диафрагма окуляра; 11 — окуляр; 12 — глаз

Настройка темнополъного освещения:

1) освещенность устанавливают по Келеру;

2) пользуются темнопольным конденсором;

3) на верхнюю линзу конденсора наносят иммерсионное масло или дистиллированную воду и поднимают конденсор до соприкосновения с нижней поверхностью предметного стекла;

4) объектив малого увеличения фокусируют на препарат;

5) при помощи центровочных винтов переводят в центр поля зрения светлое пятно (иногда имеющее затемненный центральный участок);

6) поднимая и опуская конденсор, добиваются исчезновения затемненного центрального участка и получения равномерно освещенного светлого пятна.

Если этого сделать не удается, то надо проверить толщину предметного стекла (обычно такое явление наблюдается при использовании слишком толстых предметных стекол — конус света фокусируется в толще стекла). После правильной настройки света устанавливают объектив нужного увеличения и исследуют препарат.

Устройство микроскопа

- Читать далее "Люминесцентная (флюоресцентная) микроскопия"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 9.05.2019

Остались вопросы или замечания?

Все размещенные статьи преследуют образовательную цель и предназначены для лиц имеющих базовые знания в области медицины.
Без консультации лечащего врача нельзя применять на практике любой изложенный в статье факт.
Жалобы и возникшие вопросы просим присылать на адрес statii@dommedika.com
На этот же адрес ждем запросы на координаты авторов статей - быстро их предоставим.