Некоторые виды бактерий продуцируют слизистое вещество, которое, концентрируясь вокруг тела микробной клетки, образует капсулу. При обычных методах окраски капсулы остаются бесцветными. Это позволяет применять простые методы окраски для выявления капсульных микроорганизмов в мазках из органов и тканевой жидкости.

При окраске метиленовым синим клетки тканей и тела бактерий окрашиваются в голубой цвет, вокруг бактерий сохраняется бесцветная зона — капсула, которая выявляется на темном фоне. Для окрашивания вещества капсул применяются специальные методы окраски.

а) Выявление капсул по методу Бурри:
• На узкий конец предметного стекла наносят каплю туши.
• Эмульгируют в ней бактериальную петлю (диаметр 1,5-2 мм) бульонной культуры, небольшую часть колонии, снятой с твердой питательной среды, или клинического материала, поступившего на исследование (кровь, СМЖ, мокрота и пр.).
• После тщательного перемешивания смеси петлей делают мазок, как мазок крови.
• Высушивают его на воздухе и, не фиксируя, микроскопируют с иммерсионной системой.

Фон препарата окрашен в темно-дымчатый цвет, микробные тела и капсулы не окрашиваются тушью и остаются бесцветными, вследствие чего этот метод получил название негативного. Способом Бурри можно пользоваться не только для выявления капсул микроорганизмов, но и для обнаружения в исследуемом материале спирохет.

б) Окраска капсул по способу Бурри-Ганса:
• Готовят негативно окрашенный по способу Бурри препарат.
• Фиксируют химическим способом: смесью Никифорова или другими сме
• Промывают водой.
• Окрашивают карболовым фуксином Циля, разведенным 1:3, в течение 3-5 мин.
• Препарат промывают водой, высушивают и микроскопируют с иммерсионной системой.

При микроскопии на темном фоне препарата контрастно выделяются неокрашенные капсулы, внутри которых находятся бактерии ярко-малинового цвета.

в) Окраска капсул по способу Ольта:
• Мазок на предметном стекле фиксируют одним из химических реактивов, (рецепты 1, 2, 3, 4).
• На фиксированный мазок наносят 2% горячий водный раствор сафранина, приготовленный ex tempore.
• Окрашивание ведут при подогревании в течение 1-2 мин.
• Окрашенный препарат промывают, высушивают и микроскопируют.

Перед микроскопией препарата на мазок наносят каплю воды, накрывают его покровным стеклом с иммерсионным маслом. Бактерии и капсулы по-разному преломляют лучи света. Эта разница усиливается при прохождении лучей света через слой воды.

В результате окрашивания тела бактерий приобретают коричнево-красный цвет, а капсулы — светло-желтый.

г) Окраска капсул по способу Антони:
• Исследуемый мазок, высушенный на воздухе, без предварительной фиксации окрашивают 1% водно-спиртовым раствором кристаллического фиолетового в течение 2 мин.
• Смывают краситель 20% (вес/объем) водным раствором сульфата меди (CuSO₄-5H₂O).
• Избыток раствора удаляют.
• Препарат подсушивают фильтровальной бумагой.

В результате капсулы окрашиваются в светло-голубой цвет, а тела бактерий — в темно-фиолетовый.

- Читать далее "Окраска зерен волютина бактерий"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 16.05.2019