Рецепты питательных сред: среды для определения дезоксирибонуклеазы, питательный желатин

Рецепт 108. Среда с ДНК для определения дезоксирибонуклеазы. Готовят МПА, содержащий различные концентрации ДНК — 0,05%, 0,1 % и 2%. Для этого навески сухой ДНК по 0,05; 0,1 и 0,2 г растворяют в 3,0-5,0 мл дистиллированной воды, подщелоченной при помощи 4-5 капель 2М натрия гидроксида (NaOH).

К 100 мл стерильного расплавленного 1,8% МПА (рецепт 61) pH 8,6 добавляют приготовленный раствор ДНК, перемешивают и прогревают смесь в кипящей водяной бане 20 мин. Среду хранят в холодильнике. Перед постановкой теста среду расплавляют и к ней стерильно добавляют 0,5 мл стерильного фармакопейного 10% раствора кальция хлорида.

Рецепт 109. Среда с раствором метиленового синего для теста на дезоксирибонуклеазу:
Мясопептонный агар 1,8% — 100 мл
ДНК высокополимерная 0,2 г
Метиленовый синий, 1 % водный раствор 5,0 мл
Кальций хлорид (CaCl2), 10% раствор 1 мл
pH 7,2-7,4

В пробирку к навеске ДНК добавляют 0,2 мл 40% гидроксида натрия (NaOH) и 4-5 мл дистиллированной воды. Содержимое горелки нагревают над пламенем горелки до полного растворения волокон ДНК. К расплавленному МПА добавляют раствор ДНК и кипятят 15-20 мин на водяной бане. Агар остужают до 45-50 °С и добавляют к нему раствор метиленового синего и кальция хлорида. Устанавливают pH 7,2-7,4. Приготовленную среду разливают в чашки Петри. Среда прозрачная светло-синего цвета.

Рецепт 110. Питательный желатин (для определения желатиназы). Среда предназначена для определения протеолитической активности микроорганизмов.
Бульон Хоттингера — 1000 мл
Желатин пищевой высшего сорта — 100,0 г
pН 7,1(±0,1)

Желатин вносят в бульон для набухания на 1,5-2 ч, нагревают в водяной бане при 40-50 °С до полного расплавления. Устанавливают pH. При необходимости среду фильтруют или осветляют при помощи суспензии из куриных яиц (2 яйца, размешанных в двойном объеме холодной воды, вносят в среду, нагревают до свертывания белка, затем снова фильтруют). Разливают в пробирки по 8,0-9,0 мл. Стерилизуют при 112 °С 30 мин. Готовая среда имеет желтовато-коричневый цвет.

- Читать далее "Рецепты питательных сред: молочный агар Эйкмана, бульон с куриным яичным белком, кровяной агар"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 19.09.2019

Остались вопросы или замечания?

Все размещенные статьи преследуют образовательную цель и предназначены для лиц имеющих базовые знания в области медицины.
Без консультации лечащего врача нельзя применять на практике любой изложенный в статье факт.
Жалобы и возникшие вопросы просим присылать на адрес statii@dommedika.com
На этот же адрес ждем запросы на координаты авторов статей - быстро их предоставим.