Рецепты питательных сред: среды для определения дезоксирибонуклеазы, питательный желатин
Рецепт 108. Среда с ДНК для определения дезоксирибонуклеазы. Готовят МПА, содержащий различные концентрации ДНК — 0,05%, 0,1 % и 2%. Для этого навески сухой ДНК по 0,05; 0,1 и 0,2 г растворяют в 3,0-5,0 мл дистиллированной воды, подщелоченной при помощи 4-5 капель 2М натрия гидроксида (NaOH).
К 100 мл стерильного расплавленного 1,8% МПА (рецепт 61) pH 8,6 добавляют приготовленный раствор ДНК, перемешивают и прогревают смесь в кипящей водяной бане 20 мин. Среду хранят в холодильнике. Перед постановкой теста среду расплавляют и к ней стерильно добавляют 0,5 мл стерильного фармакопейного 10% раствора кальция хлорида.
Рецепт 109. Среда с раствором метиленового синего для теста на дезоксирибонуклеазу:
Мясопептонный агар 1,8% — 100 мл
ДНК высокополимерная 0,2 г
Метиленовый синий, 1 % водный раствор 5,0 мл
Кальций хлорид (CaCl2), 10% раствор 1 мл
pH 7,2-7,4
В пробирку к навеске ДНК добавляют 0,2 мл 40% гидроксида натрия (NaOH) и 4-5 мл дистиллированной воды. Содержимое горелки нагревают над пламенем горелки до полного растворения волокон ДНК. К расплавленному МПА добавляют раствор ДНК и кипятят 15-20 мин на водяной бане. Агар остужают до 45-50 °С и добавляют к нему раствор метиленового синего и кальция хлорида. Устанавливают pH 7,2-7,4. Приготовленную среду разливают в чашки Петри. Среда прозрачная светло-синего цвета.
Рецепт 110. Питательный желатин (для определения желатиназы). Среда предназначена для определения протеолитической активности микроорганизмов.
Бульон Хоттингера — 1000 мл
Желатин пищевой высшего сорта — 100,0 г
pН 7,1(±0,1)
Желатин вносят в бульон для набухания на 1,5-2 ч, нагревают в водяной бане при 40-50 °С до полного расплавления. Устанавливают pH. При необходимости среду фильтруют или осветляют при помощи суспензии из куриных яиц (2 яйца, размешанных в двойном объеме холодной воды, вносят в среду, нагревают до свертывания белка, затем снова фильтруют). Разливают в пробирки по 8,0-9,0 мл. Стерилизуют при 112 °С 30 мин. Готовая среда имеет желтовато-коричневый цвет.
- Читать далее "Рецепты питательных сред: молочный агар Эйкмана, бульон с куриным яичным белком, кровяной агар"
Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 19.09.2019
- Рецепты питательных сред: нитратный бульон, реактив Грисса
- Рецепты питательных сред: среды для определения дезоксирибонуклеазы, питательный желатин
- Рецепты питательных сред: молочный агар Эйкмана, бульон с куриным яичным белком, кровяной агар
- Рецепты питательных сред: среда для определения лецитиназы, желточная среда по Чистовичу
- Рецепты питательных сред: среда с кукурузным маслом для определения липазы, свинцовый агар Хоменко, индикаторная бумага на сероводород
- Рецепты питательных сред: среда на подвижность и определение жгутиков, кукурузно-пептонный агар, агар KG (Kim-Gocpfert)
- Рецепты питательных сред: среда Кинга A (King А), Кинга В (King В), молочно-солевой агар С.Л. Петрович