а) Ростовые факторы. Для роста и размножения некоторых микроорганизмов, помимо источников углерода, энергии и минеральных элементов, необходимы дополнительные ростовые вещества. К ним относятся витамины, аминокислоты, факторы роста (пептиды, некоторые пурины и пиримидины).

Некоторые микроорганизмы синтезируют все эти вещества сами, другие же не способны к синтезу одного или нескольких факторов, и для обеспечения их роста необходимо его внести в питательную среду. Так, некоторые микроорганизмы не могут синтезировать ряд аминокислот, однако растут только при наличии этих «незаменимых» аминокислот в питательной среде.

В зависимости от физиологических особенностей микроорганизмов количество незаменимых для них аминокислот различно. Например, для палочек гифа и ботулизма необходима одна — триптофан, для золотистого стрептококка две — триптофан и цистеин, для молочно-кислых — 16, а для гемолитического стрептококка — 17 аминокислот. Парааминобензойная кислота является ростовым фактором многих патогенных бактерий — пневмококков, возбудителей дизентерии, никотинамид (витамин В₅) — золотистого стафилококка.

Ростовые вещества необходимы микроорганизмам в незначительных количествах: аминокислоты, пурины и пиримидины — 10,0 мкг/мл, витамины до — 1,0 мкг/мл среды. Факторы роста в среду можно вносить в виде отдельных веществ в количестве 1,0-100,0 нг/мл, однако чаще для. этих целей используют кровь (гемин), сыворотку крови, дрожжевые экстракты и автолизаты (витамины), а также молоко (казеин), яйца (лецитин), мясные гидролизаты.

Применять эти сложные по составу источники ростовых факторов удобно как с экономической точки зрения, так и в тех случаях, когда не известно, нуждается ли культура в каком-то конкретном факторе или в нескольких факторах одновременно.

б) Кровь, сыворотка. Роль их в питательных средах разнообразна: они обладают способностью адсорбировать некоторые продукты метаболизма, являются источниками гемина, жирных кислот, необходимых для роста ряда микроорганизмов, обеспечивают выявление протеолитических и гемолитических ферментов.

Среды с кровью готовят в асептических условиях, добавляя в них от 3 до 30% (обычно 5%) стерильной дефибринированной крови различных животных. Агаровые среды перед добавлением в них крови охлаждают до 45 °С.

Среды с сывороткой готовят путем добавления в них 10-20% сыворотки, не содержащей консерванта и предварительно инактивированной при 55-60° С в течение 30 мин.

в) Красители. Большинство красителей представляет собой производные бензола и его гомологов, полученные синтетическим путем. Для всех красителей характерно наличие двойных связей, которые легко разрываются с присоединением двух атомов водорода, что влечет за собой потерю цветности, и краситель превращается в бесцветное вещество — лейкосоединение.

Реакция обратима: при окислении вновь возникают двойные связи, и лейкосоединение превращается в краситель. Способность красителей легко переходить из окрашенной формы в бесцветную и обратно широко используется в бактериологической практике, в частности для дифференциации бактерий, разлагающих лактозу. Лактозоположительные бактерии образуют на среде окрашенные колонии, а лактозоотрицательные — бесцветные.

Наиболее часто используемыми красителями, входящими в состав питательных сред, являются основной фуксин, метиленовый синий и эозин.

- Читать далее "Индикаторы, ингибиторы роста в питательных средах"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 18.05.2019