Хорак и сотр. (1970) повторили эксперименты Йоклика и Меригена (1966) и поставили аналогичные опыты с вирусом коровьей оспы в куриных фибробластах. Они обнаружили, что ранний синтез мРНК вируса осповакцины в клетках мыши не подавляется мышиным интерфероном и что эта мРНК присоединяется к рибосомам и участвует в образовании полисом. На более поздних стадиях наблюдалось уменьшение как синтеза вирусной мРНК, так и образования полисом. В фибробластах куриного эмбриона, зараженных вирусом коровьей оспы, предобработка интерфероном снижала включение уридина в вирус-специфическую РНК уже через 1 ч после заражения (на более ранних сроках анализ не проводился), а также уменьшала образование полисом.

Поскольку, однако, в этой работе адсорбцию вируса коровьей оспы проводили в течение длительного времени, а данные о динамике синтеза вирусной ДНК в изучавшейся системе отсутствуют, неясно, измеряли ли Хорак и его сотрудники в действительности синтез ранней или поздней вирусной мРНК. Чтобы изучить поведение определенно «ранней» мРНК, Байели и Колби (1972) исследовали влияние предобработки интерфероном на синтез мРНК вирусом осповакцины, взаимодействие которого с клеткой было остановлено на стадии до раздевания сердцевин; они пришли к выводу, что интерферон угнетает синтез ранней мРНК, катализируемый транскриптазой, связанной с вирионом.

Однако в подобных же опытах Юнгвирт и сотр. (1972) не смогли обнаружить какого-либо уменьшения синтеза ранней мРНК вируса осповакцины под действием мышиного интерферона. У любого сложного ингибитора в такой сложной системе, как клетка, зараженная вирусом, по-видимому, должно быть больше одной специфической мишени. Как можно изучить эффект такого ингибитора в условиях, которые были бы минимально необходимыми для блокады репродукции вируса? При количественном изучении определенных этапов размножения вируса для эффективного выявления некоторых стадий иногда приходится использовать высокую множественность заражения и применять химические ингибиторы.

В этих условиях интерферон может не подействовать, а если прибегнуть к высоким дозам интерферона, то можно получить результаты, вводящие в заблуждение. Для решения проблемы важно было бы выяснить, действует ли интерферон или какой-либо индуцируемый им in vivo белок на активность вирионной транскриптазы in vitro.

У вируса везикулярного стоматита (ВВС), так же как и у вируса осповакцины, вирионы содержат РНК-полимеразу. Эта полимераза способна транскрибировать родительскую вирусную РНК in vivo в присутствии циклогексимида и актиномицина D, блокирующих синтез клеточных белков и РНК. Маркус и сотр. (1971) показали, что в клетках куриного эмбриона, предобработанных куриным (но не мышиным) интерфероном, синтез BBC-специфической РНК замедлен, а общий синтез уменьшен примерно на 60%. Обнаруженный эффект обусловлен именно замедленным включением уридина в РНК, а не изменением скорости его поглощения клетками; однако не исключено, что в предобработанных интерфероном клетках ускоряется распад вновь синтезируемой вирусной РНК.

Так как доза интерферона, подавляющая размножение ВВС на 98%, уменьшала синтез вирусной РНК только на 50%, кажется маловероятным, чтобы основной причиной подавления репродукции вируса было угнетение транскрипции РНК. Вместе с тем в клетке, возможно, существуют два разных состояния вирионных РНК-полимеразных комплексов. Устойчивый к интерферону материал может представлять собой РНК, образованную ферментными комплексами непродуктивных частиц, физиологически и топографически изолированных от системы интерферона.

Блокирующее действие интерферона на вирусную транскрипцию четко выявляется на модели синтеза ранней мРНК SV40. В присутствии цитозинарабинозида, подавляющего синтез ДНК, инфекционный процесс может останавливаться на ранней стадии, и имеются методы количественного определения ранней вирусной мРНК. В клетках приматов, предобработанных гомологичным интерфероном, синтез SV40-специфической ранней мРНК, так же как и синтез вирус-специфического Т-антигена, был подавлен примерно на 90% (Оксмен и Левин, 1971).

Хотя эти результаты как будто бы прямо доказывают подавление транскрипции, Оксмен и Левин рассматривают и другие возможные интерпретации. Можно предположить, что геном SV40 содержит особый ранний («сверхранний») ген, продуктом которого является либо сигма-подобный фактор, модифицирующий РНК-полимеразу хозяина, либо вирус-специфическая ДНК-зависимая РНК-полимераза, которая, согласно этой гипотезе, необходима для трансляции ранних генов SV40. Подавление интерфероном трансляции мРНК, считанной с гипотетического «сверхраннего» гена, могло бы привести к заметному уменьшению общего количества ранней вирусной РНК. Существенно, что предобработка интерфероном подавляет синтез Т-антигена в клетках ЗТЗ, зараженных SV40 (Оксмен и Блэк, 1966), но не влияет на образование Т-антигена в трансформированных этим вирусом клетках ЗТЗ, в которых генетический материал вируса интегрирован с клеточной ДНК (Оксмен и др., 1967).

Таким образом, на трех различных системах вирус — клетка получены данные, говорящие о подавлении интерфероном синтеза вирусной мРНК, хотя во всех этих случаях возможны и другие интерпретации. Остается неясным, во-первых, что служит первичной мишенью для ингибиторного действия интерферона in vivo и, во-вторых, существует ли только один механизм или возможно прямое влияние на несколько вирусных процессов.

- Читать далее "Усиление вирусов интерферонами. Репродукция при воздействии интерферонов"