Чувствительность радиорецепторного анализа. Зависимость точности радиорецептивного анализа
Ключевыми характеристиками любого метода анализа, в том числе и радиорецепторного, являются его чувствительность и точность. Поэтому представляется целесообразным остановиться на рассмотрении этих характеристик более подробно.
Чувствительность радиорецепторного анализа можно определить как минимальную, доступную измерению с помощью данной кривой концентрацию лиганда [L]min. Следовательно, [L]min -наименьшая концентрация лиганда, при которой отличие уровня связывания меченого лиганда с мембранами [B*]1 и уровня его связывания в отсутствие немеченого лиганда [В*]0 еще статистически значимо. Под статистической значимостью в данном случае понимается, что в предположении, что ошибки измерения величин [В*]о и [B*]i нормально распределены и оценки стандартных отклонений S1 их средних значений [В*]о и [B*]i одинаковы, средние значения [В*] и [B*]i различаются по критерию Стьюдента (Rodbard, 1978; Зайцев, Сергеева, Варфоломеев, 1985).
Анализ уравнения позволяет сделать следующие выводы: 1) чувствительность анализа возрастает с уменьшением ошибки определения [В*], характеризуемой параметром y; 2) [L]min прямо пропорциональна константе диссоциации немеченого лиганда К, поэтому ра-диорецепторный анализ необходимо проводить в условиях, обеспечивающих максимальное сродство немеченого лиганда, т.е. при оптимальных значениях температуры, рН и определенном ионном составе среды; 3) чувствительность анализа тем выше, чем меньше отношение [L*]/K*. Последнее говорит о целесообразности проведения анализа при концентрациях меченого лиганда [L*]< К*.
Выражение дает тенденцию изменения [L*] с целью оптимизации чувствительности. Однако практически нет необходимости, а иногда и возможности использовать концентрацию [L*] меньше 0,1-0,2 величины К*, поскольку, с одной стороны, это реально не дает сколь-нибудь существенного увеличения чувствительности метода, а с другой - при низкой удельной радиоактивности меченого соединения приведет к тому, что регистрация радиоактивного счета с заданной точностью, связанного с мембранами меченого лиганда, окажется слишком длительной.
В этой связи в радиорецепторном анализе следует отдавать предпочтение лигандам, меченным йодом-125 или тритием. При этом в случае трития желательно, чтобы лиганды имели специфическую радиоактивность не ниже 10-20 Ки/ммоль.
Из соотношения также следует, что чувствительность радиорецепторного метода анализа тем выше, чем меньше отношение и зависит, в частности, от величины константы неспецифического связывания Кнс.
- Читать далее "Влияние на радиорецепторный анализ гетерогенности рецепторов. Лиофилизированные мембраны в радиорецептивном анализе"
Оглавление темы "Опиоидные рецепторы":1. Чувствительность u-рецепторов под действием металлов. Взаимодействие энкефалина с бета-рецептором
2. Влияние цинка на опиоидные рецепторы. Влияние верапамила на обмен энкефалина
3. Влияние металлов на обмен морфина. Различия опиоидных и кальциевых каналов
4. Катионсвязывающие группы опиоидных рецепторов. Природа катионных групп рецепторов опиоидов
5. Фосфатные группы опиоидных рецепторов. Селективные активаторы энкефалина
6. Радиорецепторный анализ. Техника радиорецепторного анализа
7. Стабильность рецепторных препаратов. Количественное определение рецепторов
8. Чувствительность радиорецепторного анализа. Зависимость точности радиорецептивного анализа
9. Влияние на радиорецепторный анализ гетерогенности рецепторов. Лиофилизированные мембраны в радиорецептивном анализе
10. Натриевый сдвиг от лиофилизированных мембран. Фармакокинетика морфина и энкефалинов