Культуральные признаки микробов определяются характером их роста на питательных средах. Будучи постоянными для каждого вида микробов, они являются важными диагностическими признаками.

а) Рост микробов на плотной питательной среде. Для изучения свойств колоний микробы культивируют на плотных питательных средах в чашках Петри. При посеве материала стараются получить изолированный рост колоний. Чашки с посевом просматривают сначала невооруженным глазом или через лупу, затем помещают их на столик микроскопа вверх дном и просматривают колонии в проходящем свете с объективом малого увеличения и суженной диафрагмой.

Первоначальная оценка морфологии колоний на первичных средах очень важна. Просмотр чашек может дать предварительную информацию относительно результатов посева. Эти данные также важны для решения вопроса о последующих шагах, предпринимаемых с целью окончательной идентификации и характеристики колоний.

Преобладание колоний бактерий какого-либо вида в первичном посеве клинического материала часто служит одним из критериев вместе с прямыми результатами исследования мазков, приготовленных из этого материала, для оценки клинического значения микроорганизма.

Любые ключевые признаки колоний бактерий важны для их идентификации. Успех или неудача идентификации возбудителя часто зависят от точности этих оценок.

Основные признаки, используемые для характеристики колоний бактерий:

• Размер колонии. Колонии обычно измеряют в миллиметрах или пользуются для этого описательными терминами, такими, например, как точечные (диаметр менее 1 мм), мелкие (диаметр 1-2 мм), средние (диаметр 2-4 мм) и крупные (диаметр 4-6 мм и более).

• Форма колонии. Бывает правильной (круглая), неправильной (амебовидная), ризоидной (корневидная, напоминающая переплетающиеся корни деревьев).

• Контуры края. Определяют при рассмотрении колонии под лупой или микроскопом с малым увеличением. Различают ровные края в виде четко выраженной линии и неровные. Последние делят на:
— фестончатый край, состоящий из крупных, слегка округлых или уплощенных зубцов правильной формы;
— волнистый край, который отличается от фестончатого тем, что крупные зубцы его выражены нечетко;
— эрозированный или зазубренный край, состоящий из острых зубцов различной величины и формы;
— бахромчатый край, имеющий нежные ворсинки.

В некоторых случаях четко выраженная линия, отграничивающая колонию от поверхности среды, отсутствует. Такой край колонии называется расплывчатым.

• Рельеф колонии характеризуется приподнятостью ее над поверхностью питательной среды и формой на вертикальном разрезе. Определяется рельеф колонии невооруженным глазом или при помощи лупы при рассматривании сверху и сбоку. Различают:

— каплеобразные и куполообразные колонии правильной круглой формы, которые на вертикальном разрезе представляют собой сегмент шара и различаются только длиной радиуса; слабовыпуклые колонии имеют большую длину радиуса, куполообразные — меньшую;

— плоско-выпуклые колонии с плоским верхом и пологими или круто обрывающимися краями, имеющие на вертикальном разрезе форму трапеции;

— конусообразные колонии, имеющие на вертикальном разрезе форму треугольника;

- колонии с приподнятой в виде соска серединой и валиком по периферии;

— колонии с вдавленным центром;

— плоские колонии, стелющиеся по поверхности среды.

• Поверхность колонии. Изучают при помощи лупы или под микроскопом при малом увеличении. Поверхность колонии бывает матовая или блестящая с глянцем, сухая или влажная, гладкая или шероховатая. Гладкие колонии обозначают буквой S (smooth — гладкий), шероховатые — буквой R (rough— шероховатый). Механизм формирования гладких и шероховатых колоний обусловлен различием процессов клеточного деления. Микробные клетки в колониях S-форм располагаются соприкасаясь своими боковыми поверхностями; клетки R-форм, сохраняя при делении цитоплазматические мостики, образуют цепочки, которые, накладываясь друг на друга, образуют шероховатую поверхность и неровный край колонии.

Переход S-форм в R-формы наблюдается при диссоциации. Явление диссоциации у патогенных микробов наблюдается под действием антибиотики- и химиотерапии, факторов специфического иммунитета, формирующихся в течение инфекционного процесса, а также под действием факторов внешней среды.

Среди шероховатых форм колоний различают: складчатые, гирозные, по виду напоминающие исчерченную извилинами поверхность мозга; бородавчатые, концентрически или радиально исчерченные; шагреневые, т.е. мелкозернистые.

• Цвет колонии. Определяется пигментом, который продуцирует культура микробов. Преобладающее большинство патогенных бактерий пигмента не образует, вследствие чего колонии их бесцветны или молочно-мутного цвета, похожи на опал. В проходящем свете такие колонии в большей или меньшей степени прозрачны. Пигментообразующие виды микробов дают колонии различных цветов: кремовые, желтые, золотисто-оранжевые, синие, красные, сиреневые, черные и др.

• Структура колоний. Определяется в проходящем свете при слабом увеличении микроскопа, суженной диафрагме или при несколько опущенном конденсоре. У пигментированных колоний и колоний, не пропускающих света, она не определяется. По структуре различают следующие виды колоний:
— гиалиновые — бесцветные, прозрачные, без видимой определенной структуры;
— зернистые, которые в зависимости от величины зерен разделяются на мелко- и грубозернистые;
— нитевидные или волокнистые, характеризующиеся наличием длинных густо переплетающихся нитей в толще колонии.

Колонии бывают однородные и неоднородные. Строение первых одинаково во всех частях, у вторых центральная часть отличается от периферической или отдельные сектора имеют строение, отличающее их от остальной массы.

• Консистенция колоний, определяющая ее физическое состояние. Исследуют посредством прикосновения или взятия из нее части материала бактериологической петлей. По характеру консистенции колонии бывают:
— пастообразные, легко снимающиеся и размывающиеся по поверхности питательной среды наподобие сливочного масла;
— вязкие или слизистые, прилипающие и тянущиеся за петлей;
— волокнистые или кожистые, плотные снимающиеся с поверхности питательной среды в виде упругой пленки, соответствующей величине и форме колонии;
— хрупкие сухие, рассыпающиеся при прикосновении петли.

б) Особенности микробного роста на жидких питательных средах. Характер роста микробов на жидких питательных средах менее разнообразен, чем на плотных питательных средах. Однако и здесь выявлены следующие формы роста бактерий.

• Рост бактерий с равномерным помутнением среды, цвет которой остается неизменным или изменяется в соответствии с цветом водорастворимого пигмента, образующегося в культуре микроба. Такой рост характерен для многих патогенных бактерий, относящихся к группе факультативных анаэробов.

• Придонный рост бактерий, характеризующийся образованием осадка на дне пробирки с жидкой питательной средой. Осадок может быть скудным или обильным, крошковидным, гомогенным, волокнистым или в виде крупных рыхлых хлопьев, по консистенции вязким, слизистым, хрупким или пастообразным. Питательная среда над осадком может быть прозрачной или мутной. Цвет осадка и среды, находящейся над ним, определяется наличием пигмента, продуцируемого культурой микробов. Если культура не образует пигмента, цвет среды не изменяется, а осадок приобретает, как правило, серовато-белый или желтоватый цвет. Придонный рост специфичен для бактерий с анаэробным типом дыхания.

• Пристеночный рост бактерий, выражающийся в том, что питательная среда, находящаяся в пробирке, остается совершенно прозрачной. Бактерии растут, образуя более или менее крупные рыхлые хлопья или, наоборот, — компактные зерна, прикрепленные к внутренней поверхности стенок сосуда, с которых в зависимости от вида бактерий снимаются легко или с трудом.

• Поверхностный рост бактерий, характеризующийся появлением на поверхности жидкой питательной среды пленки, внешний вид и характер которой могут быть различны:
— пленка тонкая нежная бесцветная, имеет вид едва заметного налета, исчезающего при встряхивании пробирки и взбалтывании среды;
— пленка влажная толстая хорошо видимая простым глазом вязкой, слизистой консистенции, прилипает к петле и тянется за ней;
— пленка плотная сухая, по внешнему виду напоминающая кусочки кожи; при попытке взять из нее материал снимается целиком в виде круглого диска, соответствующего диаметру пробирки;
— пленка плотная сухая со сморщенной, а иногда бородавчатой поверхностью, краями прикрепленная к стенкам сосуда; при взбалтывании жидкости или прикосновении бактериологической петлей разбивается на кусочки, погружающиеся в глубь жидкости.

Цвет пленки, как и питательной среды, зависит от пигмента, вырабатываемого растущей культурой микробов. Рост бактерий в виде поверхностной пленки характерен для микробов-аэрофилов.

в) Рост на полужидкой питательной среде. Для выявления особенностей микробного роста на полужидкой питательной среде исследуемую культуру засевают в столбик 0,2-0,5% полужидкого агара. Для того чтобы особенности роста проявлялись наиболее четко, делают прокол среды в непосредственной близости от стенки пробирки. Посев, произведенный таким образом, дает возможность выявить подвижные расы микробов и дифференцировать с неподвижными.

Подвижные микробы в столбике полужидкого агара вызывают выраженное помутнение, распространяющееся более или менее равномерно по всей толще среды.

Неподвижные формы микробов растут только по ходу прокола среды, напоминая сосульки цилиндрической или конической формы. При этом окружающая среда остается совершенно прозрачной.

- Читать далее "Бактериальный стандарт мутности по Мак-Фарланду"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 22.05.2019