а) Анаэробный кровяной агар. Питательная основа — эритрит-агар. В качестве добавок используют среду 199 (10%), гемин (10 мкг/мл), твин-80 (0,1%), менадион (10мкг/мл), нитратную кровь (5%) и др. После приготовления и стерилизации разливают в чашки Петри. Для посева используют свежеразлитые (не позднее 1,5-2 ч после приготовления) или проредуцированные (не менее суток выдержанные в анаэробных условиях) среды.

б) Анаэробный кровяной агар с селективными добавками. Для подавления роста факультативно анаэробных бактерий в питательную среду добавляют один из следующих антимикробных препаратов: неомицин или канамицин (75-80 мкг/мл), гентамицин (50 мкг/мл), налидиксовую кислоту (40 мкг/мл). Вместо этих добавок на поверхность засеянной питательной среды можно накладывать по 2-4 диска с канамицином (по 1000 мкг в диске).

в) Желточный агар. В питательную среду на основе эритрит-агара добавляют гемин (10 мкг/мл), глюкозу (0,2%), суспензию яичного желтка (20%) и некоторые другие ингредиенты. Разливают в чашки Петри, используют для обнаружения лецитовителлазной и липазной активности анаэробных бактерий.

При наличии фермента лецитиназы (продуцировании альфа-токсина С. perfringens) вокруг выросших на чашке колоний микроорганизмов образуются зоны помутнения (преципитата), а при наличии липазы — зоны радужной блестящей опалесценции, видимой при косом освещении.

г) Среда для контроля стерильности (СКС). Коммерческая питательная среда. Используется как транспортная и как среда накопления. Может применяться с селективными добавками. Разливают в пробирки «высоким столбиком». Для обогащения питательной среды дополнительными факторами роста используют среду 199 (10%), гемин (10 мкг/мл), твин-80 (0,1%), менадион (10 мкг/мл) и некоторые другие ингредиенты.

д) Среда для исследования крови на бактериемию. Готовится на основе обогащенной СКС. Разливают во флаконы по 100-200 мл. Посев крови производят в объеме 5-10 мл непосредственно у постели больного.

е) Среда Кита-Тароцци. Готовится на основе бульона Хоттингера с добавлением кусочков печени или мяса и разливают по пробиркам. Используют в качестве среды накопления. После посева патологического материала для прекращения диффузии кислорода воздуха поверхность питательной среды заливают небольшим слоем вазелинового масла или расплавленного парафина.

ж) Среда Вильсона-Блера. Готовится на основе сахарного агара с добавлением сернисто-кислого натрия (1%) и хлорного железа (0,08%), разливается по пробиркам «высоким столбиком». Используется для ускоренной диагностики газовой гангрены. При наличии в исследуемом материале С. perfringens через 4-6 ч инкубации при температуре 42 °С среда чернеет и в ней появляются множественные разрывы агара.

з) Лакмусовое молоко. Готовят на основе свежего снятого молока с добавлением лакмусовой настойки, разливают в пробирки «высоким столбиком». Используют для ускоренной диагностики газовой гангрены. При наличии в исследуемом материале С. perfringens через 2-4 ч инкубации при температуре 42 °С в среде появляются кирпично-красный пронизанный пузырьками газа творожистый осадок казеина и прозрачная сыворотка.

и) Сахарный агар. Готовят на основе эритрит-агара с добавлением 1% глюкозы. Разливают в пробирки по 10-15 мл. Используют для выделения анаэробов по методам Вейнберга, Вейона-Виньяля, Перетца.

к) Среды для определения сахаролитических свойств анаэробов. Содержат 0,5% мясопептонного агара, 1% испытуемых углеводов и индикатор pH. Разливают в пробирки «высоким столбиком», добавления вазелинового масла не требуется.

- Читать далее "Методы изучения культуральных свойств микробов"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 22.05.2019