а) Отбор воздуха при помощи прибора Киктенко, Кашановой, Кидрявцева и Пущина (1961). Бактериоуловитель представляет собой стеклянную трубку длиной 200 мм, состоящую из трех частей (гладкая трубка диаметром 32 мм, сферическое расширение и небольшое грушеобразное расширение).

В трубку помещают плотный фильтр из 5 г хлопчатобумажной или 10 г тонкой стеклянной ваты. В концевую грушеобразную часть помещают 2,5 г ваты для задержки случайно проскочивших аэрозолей. Прибор вместе с ватой стерилизуют сухим жаром (40 мин при 160-170°С) или автоклавированием (30 мин при 120°С). Непосредственно перед улавливанием фильтр пропитывают стерильной смесью, приготовленной из равных объемов вазелинового масла и 3% раствора желатина (для пропитки одного фильтра достаточно 10-12 мл смеси).

К концу суженной части прибора присоединяют аспиратор. Обычно прокачивают 100-300 л воздуха.

После окончания отбора проб ватный фильтр переносят в сосуд с изотоническим раствором NaCl и тщательно отмывают встряхиванием со стеклянными бусами. Всю или часть полученной суспензии для концентрирования бактерий рекомендуется профильтровать через мембранные фильтры (№2 или №3), которые затем можно использовать для посева на поверхность плотных питательных сред.

Бактериоуловитель используют для анализа воздуха закрытых помещений и атмосферного воздуха (в том числе и при низких температурах).

б) Отбор воздуха при помощи прибора Гальперина и Рубана. В колбу для фильтрования под вакуумом (колба Бунзена) помещают 100-150 г нейтральных стеклянных бус и вносят 100 мл изотонического раствора NaCl. Затем через резиновую трубку монтируют фильтр Зейтца. Аппарат стерилизуют автоклавированием. Для аспирации воздуха можно использовать автомобильное стеклоочистительное приспособление.

Перед отбором проб на столик аппарата Зейтца кладут сначала 2 стерильных диска из фильтровальной бумаги, а затем мембранный фильтр (№1 или №2) матовой стороной вверх. Фильтр предварительно стерилизуют кипячением и просушивают. Фильтры после отбора проб отмывают в изотоническом растворе NaCl, полученную суспензию используют для посева.

в) Отбор воздуха методом мембранных фильтров. Мембранные фильтры №4 два раза по 20 мин кипятят в дистиллированной воде и высушивают в термостате при 37 °С, поместив их между двумя слоями стерильной фильтровальной бумаги в чашке Петри. Фильтры должны быть хорошо просушены, так как мокрые или влажные фильтры практически не пропускают воздух. Затем при помощи воздуходувки через фильтр просасывают воздух.

Метод может быть использован при анализе атмосферного воздуха при низких температурах.

г) Ускоренное исследование воздуха методом мембранных фильтров. После отбора пробы воздуха мембранный фильтр помещают на питательную среду на 4 ч (для подращивания микрофлоры). Затем фильтр подсушивают 20 мин и окрашивают 3 % карболовым эритрозином или 1% метиленовым синим в течение 5 мин. Отмывают 30 мин, подсушивают 10 мин, докрашивают фуксином Пфейффера или бриллиантовым зеленым 30 с, снова отмывают в течение 30 мин, подсушивают 10 мин. Затем просветляют фильтр иммерсионным маслом. Общая продолжительность такого исследования, включая микроскопию обработанных фильтров, составляет 6-7 ч.

Использование фильтров Петрянова сокращает время анализа до приблизительно 4,5 ч. В этом случае также проводят подращивание в течение 4 ч и подсушивание (2-3 мин). Затем фильтры 2 мин окрашивают фуксином Пфейффера, отмывают водой 30 с, подсушивают 2-3 мин, докрашивают метиленовым синим 30 с, промывают водой 30 с и подсушивают 2-3 мин. Просветляют фильтр гвоздичным маслом и микроскопируют.

Использование ускоренных методов целесообразно при необходимости быстрого выявления искусственных аэрозолей, о чем может свидетельствовать внезапное увеличение количества однородных микроорганизмов в воздухе.

- Читать далее "Отбор проб воздуха: метод фильтрации воздуха через твердые растворимые фильтры"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 8.10.2019