а) Двухфазная среда для гемокультур (для неприхотливых бактерий). Твердая фаза представляет собой стерильный питательный агар, около 30,0 мл (МПА, сахарный МПА), скошенный во флаконе емкостью 100 мл. Жидкая фаза — стерильный бульон (МПБ, сахарный МПБ и др.), асептически добавленный во флакон с застывшим скошенным агаром.

Количество бульона должно быть таковым, чтобы его уровень доходил до 1/2 высоты скошенной поверхности (около 30-40 мл). После внесения образца крови смесь бульона и крови тщательно перемешивают и осторожно (чтобы не смочить пробку) смачивают ею скошенную поверхность агара. Выросшая гемокультура развивается не только в бульоне, но и на агаре, что позволяет визуально установить ее чистоту, а также облегчает и ускоряет дальнейшую идентификацию по основным биологическим признакам, в том числе определение чувствительности.

б) Бульон БК HiMedia, ВС Broth. Бульон БК используют как многоцелевую среду для культивирования широкого спектра микроорганизмов и выделения гемокультур.

Бульон стимулирует обильный рост аэробных, анаэробных и микроаэрофиль-ных микроорганизмов. Может быть использован для определения стерильности растворов и биологических продуктов.

Состав, г/л:
Пептон протеозный — 20,0
Экстракт говяжий — 3,0
Экстракт дрожжевой — 3,0
Экстракт солодовый — 3,0
Декстроза — 5,0
Аскорбиновая кислота — 0,2
pH 7,2±0,2

Суспендируют 35,2г сухой смеси в 1000,0 мл холодной дистиллированной воды. Нагревают до кипения, затем продолжают нагрев до полного растворения. Разливают в пробирки и флаконы. Стерилизуют автоклавированием 15 мин при 121°С.

Если среду не используют в день приготовления, рекомендуется удалить растворенный газ путем кипячения или текучим паром в автоклаве. Охлаждают, избегая взбалтывания.

в) Сердечно-мозговой бульон HiMedia, Brain Heart Infusion Broth. Бульон с сердечно-мозговой вытяжкой для выделения гемокультур стрептококков, пневмококков, менингококков и других прихотливых микроорганизмов.

Состав:
Вытяжка телячьего мозга — 200,0
Вытяжка коровьего серди, — 250,0
Пептон протеозный — 10,0
Декстроза (глюкоза) — 2,0
Натрия хлорид — 5,0
Динатрий фосфат — 2,5
pH 7,4±0,2

Суспендируют 37,0 г сухой смеси в 1000,0 мл дистиллированной воды. Разливают в пробирки или флаконы. Стерилизуют автоклавированием 15 мин при 121°С. Добавление 1,0 г агара на 1000,0 мл среды стимулирует рост микроаэрофилов и анаэробов. Для достижения лучших результатов среду следует использовать в день приготовления.

г) Основа колумбийского бульона (среда для гемокультур) HiMedia, Columbia Broth Base. Среду используют для культивирования прихотливых микроорганизмов, таких как N. meningitidis, S. pyogenes, S. mitis, C. perfringens.

Состав, г/л:
Пептон (специальный) — 10,0
Биопептон — 10,0
Настой сердца (сухой) — 3,0
L-цистинагидрохлорид — 0,1
Глюкоза — 2,5
Натрия хлорид — 5,0
Магния сульфат — 0,1
Железа сульфат — 0,02
Натрия карбонат — 0,6
Трис (гидроксиметиламинометан) — 0,83
Трис (гидроксиметиламинометана гидрохлорид) — 2,86
pH 7,5±0,2

Суспендируют 35,0 г порошка в 1000,0 мл дистиллированной воды. Кипятят до полного растворения. При необходимости добавляют SPS (полианетол-сульфат натрия) до конечной концентрации 0,01. Разливают в пробирки, флаконы, стерилизуют автоклавированием в течение 15 мин при 121°С. Готовая среда имеет янтарный цвет.

Для лучшего выделения аэробных и анаэробных микроорганизмов можно повысить содержание цистина.

Для выделения N. meningitidis полианетол-сульфат натрия не применяют, так как он задерживает рост этого микроорганизма.

д) Тиогликолевая среда. Используется для определения стерильности материалов, фармакологических препаратов и объектов внешней среды, а также для гемокультур и культивирования факультативных и облигатных анаэробных микроорганизмов, обогащения исследуемого материала.

Состав, г/л:
Пептон — 20,0
Глюкоза — 6,0
Натрия хлорид (NaCl) — 2,5
Тиогликолят натрия — 0,5
Сульфит натрия (Na₂SO₃ * 7H₂O) — 0,1
Бикарбонат натрия (NaHCO₃) — 1,0
Агар — 0,7
pH 7,2±0,2

Все ингредиенты растворяют в 1000,0 мл дистиллированной воды, подогреваемой на слабом огне до полного растворения частиц. Затем доводят до кипения, кипятят 2 -3 мин, после чего разливают в пробирки по 4,5-5,0 мл. Стерилизуют при 121°С 20 мин. При необходимости перед употреблением в пробирки стерильно вносят по 0,5 мл лошадиной или бычьей сыворотки.

- Вернуться в оглавление раздела "Медицинская микробиология"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 25.2.2020