Среды для гемокультур бактерий

а) Двухфазная среда для гемокультур (для неприхотливых бактерий). Твердая фаза представляет собой стерильный питательный агар, около 30,0 мл (МПА, сахарный МПА), скошенный во флаконе емкостью 100 мл. Жидкая фаза — стерильный бульон (МПБ, сахарный МПБ и др.), асептически добавленный во флакон с застывшим скошенным агаром.

Количество бульона должно быть таковым, чтобы его уровень доходил до 1/2 высоты скошенной поверхности (около 30-40 мл). После внесения образца крови смесь бульона и крови тщательно перемешивают и осторожно (чтобы не смочить пробку) смачивают ею скошенную поверхность агара. Выросшая гемокультура развивается не только в бульоне, но и на агаре, что позволяет визуально установить ее чистоту, а также облегчает и ускоряет дальнейшую идентификацию по основным биологическим признакам, в том числе определение чувствительности.

б) Бульон БК HiMedia, ВС Broth. Бульон БК используют как многоцелевую среду для культивирования широкого спектра микроорганизмов и выделения гемокультур.

Бульон стимулирует обильный рост аэробных, анаэробных и микроаэрофиль-ных микроорганизмов. Может быть использован для определения стерильности растворов и биологических продуктов.

Состав, г/л:
Пептон протеозный — 20,0
Экстракт говяжий — 3,0
Экстракт дрожжевой — 3,0
Экстракт солодовый — 3,0
Декстроза — 5,0
Аскорбиновая кислота — 0,2
pH 7,2±0,2

Суспендируют 35,2г сухой смеси в 1000,0 мл холодной дистиллированной воды. Нагревают до кипения, затем продолжают нагрев до полного растворения. Разливают в пробирки и флаконы. Стерилизуют автоклавированием 15 мин при 121°С.

Если среду не используют в день приготовления, рекомендуется удалить растворенный газ путем кипячения или текучим паром в автоклаве. Охлаждают, избегая взбалтывания.

в) Сердечно-мозговой бульон HiMedia, Brain Heart Infusion Broth. Бульон с сердечно-мозговой вытяжкой для выделения гемокультур стрептококков, пневмококков, менингококков и других прихотливых микроорганизмов.

Состав:
Вытяжка телячьего мозга — 200,0
Вытяжка коровьего серди, — 250,0
Пептон протеозный — 10,0
Декстроза (глюкоза) — 2,0
Натрия хлорид — 5,0
Динатрий фосфат — 2,5
pH 7,4±0,2

Суспендируют 37,0 г сухой смеси в 1000,0 мл дистиллированной воды. Разливают в пробирки или флаконы. Стерилизуют автоклавированием 15 мин при 121°С. Добавление 1,0 г агара на 1000,0 мл среды стимулирует рост микроаэрофилов и анаэробов. Для достижения лучших результатов среду следует использовать в день приготовления.

г) Основа колумбийского бульона (среда для гемокультур) HiMedia, Columbia Broth Base. Среду используют для культивирования прихотливых микроорганизмов, таких как N. meningitidis, S. pyogenes, S. mitis, C. perfringens.

Состав, г/л:
Пептон (специальный) — 10,0
Биопептон — 10,0
Настой сердца (сухой) — 3,0
L-цистинагидрохлорид — 0,1
Глюкоза — 2,5
Натрия хлорид — 5,0
Магния сульфат — 0,1
Железа сульфат — 0,02
Натрия карбонат — 0,6
Трис (гидроксиметиламинометан) — 0,83
Трис (гидроксиметиламинометана гидрохлорид) — 2,86
pH 7,5±0,2

Суспендируют 35,0 г порошка в 1000,0 мл дистиллированной воды. Кипятят до полного растворения. При необходимости добавляют SPS (полианетол-сульфат натрия) до конечной концентрации 0,01. Разливают в пробирки, флаконы, стерилизуют автоклавированием в течение 15 мин при 121°С. Готовая среда имеет янтарный цвет.

Для лучшего выделения аэробных и анаэробных микроорганизмов можно повысить содержание цистина.

Для выделения N. meningitidis полианетол-сульфат натрия не применяют, так как он задерживает рост этого микроорганизма.

д) Тиогликолевая среда. Используется для определения стерильности материалов, фармакологических препаратов и объектов внешней среды, а также для гемокультур и культивирования факультативных и облигатных анаэробных микроорганизмов, обогащения исследуемого материала.

Состав, г/л:
Пептон — 20,0
Глюкоза — 6,0
Натрия хлорид (NaCl) — 2,5
Тиогликолят натрия — 0,5
Сульфит натрия (Na2SO3 * 7H2O) — 0,1
Бикарбонат натрия (NaHCO3) — 1,0
Агар — 0,7
pH 7,2±0,2

Все ингредиенты растворяют в 1000,0 мл дистиллированной воды, подогреваемой на слабом огне до полного растворения частиц. Затем доводят до кипения, кипятят 2 -3 мин, после чего разливают в пробирки по 4,5-5,0 мл. Стерилизуют при 121°С 20 мин. При необходимости перед употреблением в пробирки стерильно вносят по 0,5 мл лошадиной или бычьей сыворотки.

- Вернуться в оглавление раздела "Медицинская микробиология"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 25.2.2020

Остались вопросы или замечания?

Все размещенные статьи преследуют образовательную цель и предназначены для лиц имеющих базовые знания в области медицины.
Без консультации лечащего врача нельзя применять на практике любой изложенный в статье факт.
Жалобы и возникшие вопросы просим присылать на адрес statii@dommedika.com
На этот же адрес ждем запросы на координаты авторов статей - быстро их предоставим.