а) Определение количества термофильных бактерий. Для определения количества термофильных бактерий разведения почвенной суспензии (10^-1, 10^-2 и 10^-3) по 1 мл вносят в чашки Петри (засевают по 2-3 параллельных чашки на разведение). Затем чашки заливают расплавленным и остуженным МПА, содержимое тщательно перемешивают. Важно отметить, что в данном случае МПА разливают более толстым слоем, чем обычно. Посевы инкубируют при 60 °С (от 58 до 63 °С) в течение 24 ч, а затем подсчитывают количество выросших колоний и пересчитывают на 1 г почвы.

б) Определение количества актиномицетов. Актиномицеты (от греч. actis—луч и mycos — гриб) — большая и разнообразная группа грамположительных хемогетеротрофных бактерий. Обычно образуют ветвящиеся нити (диам. 0,5-1,0 мкм). Нити могут распадаться на элементы разных размеров или сохраняться целыми и образовывать артроспоры. Споры одиночные в цепочках разной длины или в спорангиях.

Для учета почвенных актиномицетов часто используют крахмаламмиачный агар (КАА), среду Ваксмана или среду Чапека. Необходимо отметить, что па этих средах хорошо растут не только актиномицеты, но и другие бактерии. Однако актнномицеты легко отличить от других микроорганизмов по характерным плотным компактным колониям, имеющим мицелиальное строение и срастающимся с субстратом, из-за чего они с трудом снимаются петлей с поверхности среды. При этом одни виды актиномицетов образуют гладкие колонии, а другие — складчатые, бугристые, корковидные, пушистые, бархатистые или мучнистые. Ряд актиномицетов образует пигменты самой разнообразной окраски.

Посев производят из разведений от 10^-2 до 10^-4 включительно. Посевной материал в объеме 0,1 мл наносят на поверхность одной из рекомендованных плотных сред в чашке Петри. Внесенную суспензию тщательно равномерно распределяют но всей поверхности среды стерильным шпателем. Чашки переворачивают. Каждое разведение высевают в четырехкратной повторности. Посевы культивируют 8-10 сут. при 28-30 °С. Затем подсчитывают число колоний актиномицетов в каждой чашке Петри.

Рассчитывают наиболее вероятное число актиномицетов в 1 г исследуемой почвы. При уровне достоверности 95% (Р_0,95) для этого используют следующую формулу:

Описание методов выделения и определения патогенных актиномицетов можно найти в специальных разделах и руководствах.

- Читать далее "Определение количества грибов в почве"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 29.09.2019