Советуем для ознакомления:

Лаборатория:

Популярные разделы сайта:

Определение мочевой кислоты. Метод Бенедикта

Метод основан на том, что при прибавлении фосфорно-мышьяково-вольфрамового реактива к раствору крови, освобожденной от белка, при наличии мочевой кислоты получается синее окрашивание. Определяют сравнением цвета со стандартным раствором мочевой кислоты, к которому прибавляется тот же реактив.

Для определения берут из вены 2—3 мл крови, вливают ее в сухую пробирку, на дно которой всыпано 0,02 г щавелевокислого натрия, и тщательно смешивают, чтоб не произошло свертывания.

Необходимые реактивы:
1) 10% раствор вольфрамовокислого натрия;
2) раствор серной кислоты (2 объема нормального раствора серной кислоты и один объем дистиллированной воды);
3) в литровой колбе с 600 мл дистиллированной воды растворяют 100 г вольфрамовокислого натрия (Na2W04), добавляют 50 г мышьяковой кислоты (AS2O5), 0,25 мл фосфорной кислоты (Н3Р04), 20 мл крепкой соляной кислоты (HCl) удельного веса 1,19. Полученную смесь кипятят 20 минут. В охлажденную смесь доливают дистиллированной воды до объема 1 литра;
4) 5 г цианистого натрия (NaCN) растворяют в 100 мл дистиллированной воды и добавляют 0,2 мл крепкого нашатырного спирта (аммиака);
5) стандартный раствор мочевой кислоты.

определение мочевой кислоты

Основной раствор «А». 9 г двузамещенного фосфорнокислого натрия (Na2HP04) и 1 г однозамещенного фосфорнокислого натрия (NaH2P04) растворяют в 500 мл горячей дистиллированной воды и фильтруют. В горячий профильтрованный раствор всыпают 0,2 г химически чистой мочевой кислоты. Мочевая кислота в горячем фосфате растворяется полностью. После охлаждения раствора к нему прибавляют 1,4 мл ледяной уксусной кислоты и доливают дистиллированной водой до одного литра (1000 мл). Один миллилитр полученного основного раствора содержит 0,2 мг мочевой кислоты. Этот раствор при прибавлении к нему немного хлороформа или толуола сохраняется хорошо в темном и прохладном месте 2—3 месяца.

Из основного раствора «А» при определении приготовляют два раствора соответствующего разведения. Раствор «Б»: в колбу объемом в 500 мл вливают 25 мл основного раствора «А», добавляют 200 мл дистиллированной воды, 2,5 мл крепкой соляной кислоты и доливают дистиллированной воды до метки. Один миллилитр этого раствора содержит 0,01 мг мочевой кислоты.

Раствор «В», употребляемый для определения более низких концентраций мочевой кислоты: в колбу объемом в 500 мл вливают 10 мл основного раствора «А», добавляют 200 мл дистиллированной воды, 2,5 мл крепкой соляной кислоты и дистиллированной воды до объема 500 мл. Один миллилитр этого раствора содержит 0,004 мг мочевой кислоты.

- Читать далее "Техника определения мочевой кислоты. Диагностика мочевины крови"

Оглавление темы "Биохимия крови":
1. Определение мочевой кислоты. Метод Бенедикта
2. Техника определения мочевой кислоты. Диагностика мочевины крови
3. Техника определения мочевины крови. Последовательность выявления мочевины
4. Остаточный азот. Определение остаточного азота
5. Способ Кьельдаля. Определение остаточного азота по Кьедалю
6. Определение билирубина крови. Реакция ван ден Берга
7. Определение билирубина в крови по Бокальчуку. Реакция Таката-Ара при заболеваниях печени
8. Упрощенная реакция Таката-Ара. Тимоловая проба
9. Определение холестерина. Метод Аутенрита
10. Определение холестерина с осаждением белков. Определение калия