Животных всех исследуемых групп декапитировали. При таком способе забоя наблюдается наименьшее количество повреждений в ткани миокарда [Семенова Л. А., Целлариус Ю. Г., 1978]. Затем вскрывали грудную и брюшную полости, отсекали от окружающих тканей сердце и помещали его в холодовую камеру до прекращения сердцебиений. После этого определяли массу сердца и быстро проводили забор материала для электронной микроскопии. Чтобы не повредить папиллярные мышцы, полость левого желудочка вскрывали с помошью острой бритвы разрезом через стенку правого желудочка и межжелудочковую перегородку.

Захватив глазным анатомическим пинцетом хордальные нити папиллярной мышцы, ее отсекали у места прикрепления маленькими ножницами и погружали в охлажденный фиксатор (4° С). От момента извлечения сердца до погружения образца в фиксатор проходило не более 2 мин. Вскрытое сердце помещали в 10%-ный раствор нейтрального формалина.

Затем извлекали легкие, печень, почки, надпочечники и селезенку, взвешивали их и вырезали топографические пластинки толщиной 0,5 см для гистологического исследования. Эти образцы тканей также фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина при комнатной температуре.

На следующий день обе половинки сердца разрезали по межжелудочковой перегородке, отсекали предсердия и определяли абсолютную массу фиксированных левого и правого желудочков сердца. Кроме того, проводили дополнительную вырезку образцов тканей, окончательная толщина кусочков не превышала 0,3 см. После фиксации в формалине не менее 48 ч образцы тканей обезвоживали и заливали в парафин в гистологическом автомате АТ-4.

Для выявления углеводных соединений использовали метахроматическое окрашивание толуидиновым синим или азуром II, ставили PAS-реакцию (с соответствующими контролями). Окрашивание проводили по хорошо разработанным и описанным ранее методикам.

Для оценки состояния сократительного аппарата сердечных миоцитов применяли метод поляризационной микроскопии [Целлариус Ю. Г. и др., 1980]. Этот метод позволяет выявлять ранние стадии повреждения мышечных клеток сердца по изменению их двулучепреломления. В настоящее время выделено несколько форм острой патологии мышечных клеток сердца:
1) контрактурный тип повреждения, при котором в кардиомиоците возникает тотальное или очаговое сокращение миофибрилл;
2) внутриклеточный миоцитолизис, возникающий в результате очагового лизиса миофибрилл, и
3) глыбчатый распад миофибрилл, характеризующийся одномоментным мозаичным сокращением нескольких групп саркомеров и лизисом несократившихся участков миофибрилл. Для исследования в поляризованном свете использовали неокрашенные (депарафинированные) и окрашенные гематоксилином и эозином срезы ткани миокарда [Целлариус Ю. Г., Семенова Л. А., 1972; Непомнящих Л. М., 1981].

- Читать далее "Морфометрия миокарда. Стереология миокарда"