САМР-тест используют как один из стабильных биологических признаков при диффенциации S. agalactiae (стрептококк группы В) и гемолитических стрептококков других серологических групп.

Тест основан на способности S. agalactiae продуцировать внеклеточный белковый субстрат со слабовыраженной гемолитической активностью, которая существенно возрастает при совместном его выращивании со S. aureus, вырабатывающим β-токсин, но без прямого контакта с последним.

а) Техника постановки теста. На 5% кровяной агар по диаметру чашки высевают прямым штрихом S. aureus, продуцирующий р-токсин. Перпендикулярно линии посева S. aureus, но не достигая ее примерно на 0,5 см, отдельными параллельными полосами с интервалом не менее 1 см наносят 18-часовые культуры, подозреваемые на S. agalactiae.

На одной чашке можно идентифицировать до 6 штаммов стрептококка. Засеянные чашки помещают в термостат при 35(±1)°С. Учет результатов проводят через 20-24 ч.

б) Учет результатов. При положительном результате САМР-теста штаммы стрептококка группы В (S. agalactiae) в точке предполагаемого пересечения с линией S. aureus образуют зону клиновидной формы с наиболее выраженным проявлением гемолиза. При отрицательной реакции зона усиления β-гемолиза в точке сближения роста S. agalactiae и S. aureus не появляется.

САМР-тест рекомендуется ставить с заведомо положительным и отрицательным контролями: эталонным штаммом S. agalactiae ATSS 13819 — положительный контроль, S. pyogenes ATSS 19165 — отрицательный контроль.

в) Постановка САМР-теста с целью отдифференцировать L. monocytogenes — возбудителя антропонозных и зоонозных инфекций от зоонозов. Для дифференциальной диагностики микроорганизмов рода Listeria: L. Monocytogenes, патогенных для человека, и L. ivanovii, L. seeligeri — возбудителей листериоза животных рекомендуется модификация описанного выше САМР-теста, применяемого для идентификации S. agalactiae.

Вместо одного эталонного гемолитического микроорганизма (S. aureus) реакцию ставят с гемолитическими штаммами двух видов микроорганизмов — S. aureus и Rodococcus equi.

Двухсуточные культуры стафилококка и родококка высевают в чашки Петри на МПА с 5% овечьей крови двумя параллельными линиями на расстоянии 3-3,5 см друг от друга. В свободном пространстве между ними, отступя на 0,5 см от вертикальных штрихов S. aureus и R. equi, высевают параллельными линиями на расстоянии 1 см друг от друга штаммы испытуемых культур листерии. Посевы инкубируют при температуре 35 °С в течение 24-48 ч.

По истечении указанного времени учитывают результаты: усиление гемолиза в зонах прилегания посевов листерий к линиям роста S. aureus и R. equi. Усиление и увеличение зоны гемолиза близ роста S. aureus свидетельствуют о положительной реакции на L. monocytogenes и L. seeligeri. Усиление и увеличение зоны гемолиза близ штриха R. equi характерно для культур L. ivanovii.

- Читать далее "Тест на лецитиназу в идентификации микроорганизмов"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 7.06.2019