ИФА-ловушка для IgМ
С целью создания более чувствительных и специфичных тест-систем ИФА для ранней иммунодиагностики инфекционных заболеваний, которая осуществляется путем выявления Ат класса IgM, разработана модификация ИФА-«ловушка».
Принцип метода заключается в том, что на поверхность твердой фазы (96-луночные плоскодонные планшеты) нанесены моноклональные Ат к IgM человека. Поэтому на первом этапе исследования в результате инкубации тестируемых и контрольных сывороток с иммуносорбентом происходит специфическое связывание (вылавливание) всех сывороточных IgM.
После отмывания лунок планшетов от неспецифически связавшихся иммуноглобулинов других классов (IgG, IgA) туда вносят конъюгат, где в качестве носителя используется меченный ферментом Аг, к которому собираются выявлять IgM-Ат. Такой конъюгат будет связываться только со специфическими IgM-Ат. После отмывания лунок планшетов от неспецифически связавшихся молекул конъюгата в них добавляют субстратную смесь. Появление окраски свидетельствует о наличии в сыворотке специфических IgM.
Тест-системы ИФА, сконструированные по принципу «ловушки» для IgM, разработаны, в частности, для ранней иммунодиагностики сифилиса. В качестве конъюгата в них используют Аг Tr.pallidum, меченный пероксидазой хрена.
А — внесение сывороток (реакция антиген — антитело); Б — внесение конъюгата; В — внесение субстратной смеси; Г — учет результатов;
1 — моноклональные Ат к IgM; 2 — IgM;
3 — IgG, IgA;
4 — конъюгат (Аг, меченный ферментом);
5 — индикатор ОФД/ТМБ.
- Читать далее "Сэндвич-ИФА: качественное выявление циркулирующих антигенов"
Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 31.08.2019
- ИФА в диагностике инфекционных заболеваний
- Схема проведения непрямого твердофазного ИФА
- Тест-системы ИФА для выявления различных классов специфических Ат с использованием 96-луночных плоскодонных планшетов в качестве иммуносорбентов
- Тест-системы ИФА для качественного и количественного выявления различных классов специфических Ат с карточками-гребешками в виде иммуносорбентов
- Чувствительность тест-систем ИФА и лабораторные ошибки ИФА
- Подтверждающий анализ «Вестернблот»: тест система, проведение
- ИФА-ловушка для IgМ
- Сэндвич-ИФА: качественное выявление циркулирующих антигенов