ИФА-ловушка для IgМ

С целью создания более чувствительных и специфичных тест-систем ИФА для ранней иммунодиагностики инфекционных заболеваний, которая осуществляется путем выявления Ат класса IgM, разработана модификация ИФА-«ловушка».

Принцип метода заключается в том, что на поверхность твердой фазы (96-луночные плоскодонные планшеты) нанесены моноклональные Ат к IgM человека. Поэтому на первом этапе исследования в результате инкубации тестируемых и контрольных сывороток с иммуносорбентом происходит специфическое связывание (вылавливание) всех сывороточных IgM.

После отмывания лунок планшетов от неспецифически связавшихся иммуноглобулинов других классов (IgG, IgA) туда вносят конъюгат, где в качестве носителя используется меченный ферментом Аг, к которому собираются выявлять IgM-Ат. Такой конъюгат будет связываться только со специфическими IgM-Ат. После отмывания лунок планшетов от неспецифически связавшихся молекул конъюгата в них добавляют субстратную смесь. Появление окраски свидетельствует о наличии в сыворотке специфических IgM.

Тест-системы ИФА, сконструированные по принципу «ловушки» для IgM, разработаны, в частности, для ранней иммунодиагностики сифилиса. В качестве конъюгата в них используют Аг Tr.pallidum, меченный пероксидазой хрена.

ИФА-ловушка для IgМ
Схема проведения исследования в тест-системе ИФА-«ловушки» для IgM:
А — внесение сывороток (реакция антиген — антитело); Б — внесение конъюгата; В — внесение субстратной смеси; Г — учет результатов;
1 — моноклональные Ат к IgM; 2 — IgM;
3 — IgG, IgA;
4 — конъюгат (Аг, меченный ферментом);
5 — индикатор ОФД/ТМБ.

- Читать далее "Сэндвич-ИФА: качественное выявление циркулирующих антигенов"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 31.08.2019

Остались вопросы или замечания?

Все размещенные статьи преследуют образовательную цель и предназначены для лиц имеющих базовые знания в области медицины.
Без консультации лечащего врача нельзя применять на практике любой изложенный в статье факт.
Жалобы и возникшие вопросы просим присылать на адрес statii@dommedika.com
На этот же адрес ждем запросы на координаты авторов статей - быстро их предоставим.