Рецепт 77. Триптон-соевый бульон без декстрозы (HiMedia, Tryptone Soya Broth Without Dextrose, Cat. M322). Относится к средам с низким содержанием углеводов. Ее можно использовать при добавлении углевода и индикатора на кислотной основе для изучения ферментации у требовательных и нетребовательных микроорганизмов, таких как S. pneumoniae, S. pyogenes, Staphylococcus spp.:

Триптон — 17,0 г
Пептон соевый — 3,0 г
Натрия хлорид (NaCl) — 5,0 г
Калия дигидрофосфат (КН₂РO₄) — 2,5 г
pH 7,3(±0,2)

Суспендируют указанное на этикетке количество сухой смеси в 1000 мл дистиллированной воды. Нагревают до полного растворения. При необходимости добавляют углевод в концентрации от 0,5 до 1,0% и индикатор феноловый красный — 0,02, предварительно разведенный в 2-3 мл дистиллированной воды.

Среду разливают в пробирки с поплавками, стерилизуют 15 мин при 121 °С. Через 18-48 ч культивирования при 35-37 °С учитывают результаты.

Ферментация углеводов сопровождается снижением pH, что вызывает изменение красного цвета индикатора на желтый, при газообразовании на дне поплавков скапливаются пузырьки газа.

Рецепт 78. Основа среды СНО для анаэробной ферментации (HiMedia, СНО Medium Base, Cat. М351). Основа среды СНО используется как базовая среда для изучения ферментации углеводов анаэробными бактериями (клостридии, бактероиды и др.)

Триптон — 15,0 г
Экстракт дрожжевой — 7,0 г
L-цистин — 0,25 г
Натрия хлорид (NaCl) — 2,5 г
Аскорбиновая кислота — 0,1 г
Натриевая соль меркаптоуксусной кислоты* (HSCH₂COONa) — 0,5 г
Бромтимоловый синий — 0,01 г
Агар — 0,75 г
pH 7,0(±0,2)
* Тиогликолевая (меркаптоуксусная) кислота.

Суспендируют указанное на этикетке количество коммерческой сухой смеси в 1000 мл дистиллированной воды. Добавляют 6,25 мл 10% стерильного раствора углевода и нагревают до полного растворения среды. Разливают в пробирки с поплавками. Стерилизуют автоклавированием 15 мин при температуре 121 °С.

В соответствии с потребностям анаэробов среда содержит высокие концентрации триптона и вспомогательных ростовых факторов даже для прихотливых анаэробов.

Для изучения ферментативных реакций используют суточные культуры, выращенные на кровяном агаре. Посев производят уколом по всему столбику среды до дна пробирки.

Посевы инкубируют в термостате при 35 °С анаэробно в течение 1 нед., ежедневно просматривая результаты. Отмечают образование кислоты по изменению окраски среды с голубовато-зеленой на желтую; газообразование — по скоплению пузырьков газа в трубках Durchem.

- Читать далее "Рецепты питательных сред: плотная среда с крахмалом, среда Хью-Лейфсона для OF-теста"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 16.09.2019