Рецепты питательных сред: молоко с метиленовым синим, лакмусовое молоко в прописи Минкевича, среда для определения редукции ТТХ

Рецепт 70. Молоко с метиленовым синим (для теста на редуцирующую способность). Свежее молоко доводят на огне до кипения, оставляют в прохладном месте на сутки, освобождают его от сливок, вторично кипятят, оставляют снова на сутки и вторично снимают верхний слой. Обезжиренное таким образом молоко фильтруют через толстый слой ваты, подщелачивают 10 % раствором углекислого натрия до pH 7,2.

К 100 мл молока добавляют 2 мл 1 % водного раствора метиленового синего. Приготовленную среду разливают по 5 мл в стерильные пробирки и стерилизуют текучим паром три дня подряд по 30 мин. Среда после остывания имеет насыщенно голубой цвет, при редукции метиленовым синим обесцвечивается и приобретает кремовый цвет.

Рецепт 71. Лакмусовое молоко в прописи Минкевича (для теста на редуцирующую способность). 100 мл свежего молока подщелачивают 10% раствором питьевой соды (Nall С О,) до слабощелочной реакции (по лакмусу), кипятят и прибавляют 100 мл дистиллированной воды и 5 мл лакмусовой настойки.

Приготовленную таким образом среду сливают в бутыли, прибавляют на 1 л 10 мл хлороформа, плотно закрывают резиновой или корковой пробкой, хорошо встряхивают и ставят на 2-3 дня в темное место. Будучи тяжелее воды, хлороформ оседает на дно, увлекая за собой растворившиеся в нем сливки. Обезжиренную таким образом среду осторожно сливают, разливают в пробирки по 5 мл и стерилизуют 20 мин при температуре 115 °С.

Вынутая из автоклава среда вследствие редукции лакмуса имеет желтый цвет и только через несколько часов приобретает характерный для нее слабо-фиолетовый оттенок.

Рецепт 72. Среда для определения редукции ТТХ (энтерококковая дифференциально-диагностическая среда — ЭДДС).

А. Основной раствор:
Сухой питательный агар — 35,0 г
Сухой экстракт дрожжей — 3,0 г
или автолизат дрожжей — 20 мл
Глюкоза — 10,0 г
Вода дистиллированная — 800 мл

Ингредиенты смешивают, растворяют при кипении. Доводят pH до 7,2-7,4. При необходимости фильтруют. Стерилизуют при 112 °С в течение 15 мин. Основа среды имеет желтовато-коричневый цвет. Перед разливом в чашки в среду добавляют раствор Б.

Б. Раствор ТТХ с добавками:
2,3,5-тетрафенилтетразолий хлорид — 0,1 г
Водный раствор кристаллического фиолетового 0,01 % — 12,5 мл
Налидиксовая кислота — 0,1 г/л
Обезжиренное молоко — 200 мл (подогревают до 40-44 °С)
Свежая дефибринированная кровь — 50 мл

После осторожного перемешивания смесь в асептических условиях добавляют в основной раствор, остуженный до температуры 45-50° С, и разливают в чашки Петри.

- Читать далее "Рецепты питательных сред: цветные среды Гисса с углеводами"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 13.09.2019

Оглавление темы "Рецепты препаратов и питательных сред.":
  1. Рецепты растворов для окрашивания бактериальных препаратов
  2. Рецепты кислотно-основных индикаторов для окрашивания бактериальных препаратов
  3. Рецепты кислотно-основных буферных растворов для окрашивания бактериальных препаратов
  4. Рецепты питательных сред: мясная вода, пептонная вода, мясопептонный бульон
  5. Рецепты питательных сред: мясопептонный агар, питательный бульон
  6. Рецепты питательных сред: трептический перевар, бульон, агар Хоттингера
  7. Рецепты питательных сред: сахарный бульон, сахарный агар, реактивы на оксидазу
  8. Рецепты питательных сред: молоко с метиленовым синим, лакмусовое молоко в прописи Минкевича, среда для определения редукции ТТХ
  9. Рецепты питательных сред: цветные среды Гисса с углеводами
  10. Рецепты питательных сред: пептонная вода для ферментации углеводов, бульон с феноловым красным

    О сайте:

  1. Контакты и пользовательское соглашение